【摘 要】
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目的脱髓鞘疾病中,少突胶质细胞的分化障碍会导致髓鞘再生失败,引发脱髓鞘疾病。脱髓鞘疾病常伴有免疫反应的发生。小胶质细胞作为中枢神经系统的固有免疫细胞,具有高度的可塑性。本研究旨在探讨促炎型（M1）小胶质细胞和抗炎型（M2）小胶质细胞对少突胶质细胞成熟的作用机制。方法小胶质细胞和少突胶质细胞的原代培养;用CCK-8检测不同浓度脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）和白介素-4（Int
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目的脱髓鞘疾病中,少突胶质细胞的分化障碍会导致髓鞘再生失败,引发脱髓鞘疾病。脱髓鞘疾病常伴有免疫反应的发生。小胶质细胞作为中枢神经系统的固有免疫细胞,具有高度的可塑性。本研究旨在探讨促炎型（M1）小胶质细胞和抗炎型（M2）小胶质细胞对少突胶质细胞成熟的作用机制。方法小胶质细胞和少突胶质细胞的原代培养;用CCK-8检测不同浓度脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）和白介素-4（Interleukin-4,IL-4）对小胶质细胞活性的影响,筛选合适的药物浓度;仅用基础培养基、LPS（0.1、1 ug/mL）或IL-4（20、40 ng/mL）分别诱导M0型、M1型和M2型小胶质细胞;通过免疫荧光和蛋白免疫印迹检测M1/M2特异性标志物i NOS和CD206的表达,ELISA检测小胶质细胞条件培养基中细胞因子TNF-α、IL-1β、TGF-β1、IGF-1的释放,对诱导的M1、M2型小胶质细胞进行鉴定;M0、M1、M2型小胶质细胞与OPC直接接触培养或用其条件培养基培养OPC;用免疫荧光和蛋白质免疫印迹检测成熟少突胶质细胞特异性蛋白髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）的表达。结果1.与对照组相比,LPS（0.1、1 ug/mL）处理的小胶质细胞均显著性表达i NOS,条件培养基中促炎因子TNF-α、IL-1β的分泌量显著性升高,而TGF-β1、IGF-1的分泌量无明显变化。IL-4（20、40 ng/mL）处理的小胶质细胞均较对照组显著性表达CD206,但只有40 ng/mL的IL-4处理的小胶质细胞条件培养基中TGF-β1、IGF-1的分泌量显著性升高,TNF-α、IL-1β的分泌量无明显变化。2.不同表型小胶质细胞的条件培养基处理OPC后,各组之间的MBP表达量未见明显差异。3.同仅用分化培养基的对照组相比,与M0、M1、M2型共培养的少突胶质细胞MBP表达量均显著下降。其中,与M2型细胞共培养相较与M1型细胞共培养的少突胶质细胞MBP表达量显著升高。结论在体外,不同表型的小胶质细胞对少突胶质细胞的成熟有不同的作用。M2型小胶质细胞相较于M1型小胶质细胞对少突胶质细胞成熟的抑制作用更小,这为脱髓鞘疾病提供了新的治疗思路和方向。
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