【摘 要】
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目的:制备超顺磁性壳聚糖质粒明胶微球(SPCPGM),将其与生物活性人工骨复合,在体外观测SPCPGM在外磁场(静磁场和/或振荡磁场)的作用下控释、浓聚质粒的功能;在体内观测SPCPGM
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目的:制备超顺磁性壳聚糖质粒明胶微球(SPCPGM),将其与生物活性人工骨复合,在体外观测SPCPGM在外磁场(静磁场和/或振荡磁场)的作用下控释、浓聚质粒的功能;在体内观测SPCPGM在外磁场(静磁场和/或振荡磁场)下促进生物活性人工骨血管化及成骨的作用。评估振荡磁场和/或静磁场下SPCPGM促进人工骨血管化及成骨的效果,初步探讨其临床应用价值。方法:⑴用化学共沉淀法制备超顺磁性壳聚糖纳米球(SPFCN),用扫描电镜、红外光谱仪、X-光衍射仪、Zeta电势分析仪和磁力天平对合成的SPFCN进行形貌观察和结构表征。⑵制备大量能够在真核细胞中表达人VEGF165 (hVEGF165 )—红色荧光融合蛋白( RFP )质粒(pDsVEGF165Red1-N1)。用SacⅡ、HandⅢ双酶切后行琼脂糖凝胶电泳分析鉴定,并对质粒进行DNA序列测定,用SmartSpecTM3000核酸蛋白测定仪测定其纯度和浓度。⑶制备超顺磁性壳聚糖质粒(pDsVEGF165Red1-N1)复合物(SPCPN)。用琼脂糖凝胶电泳考察其结合质粒DNA的能力;用磁力天平测试其磁感应性。通过在静磁场下,人脐静脉内皮细胞(HUVEC-1)和人成骨肉瘤细胞(MG-63)转染实验,用倒置荧光显微镜、流式细胞仪及原子吸收光谱仪测定,观测静磁场促进SPCPN
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