1、背景与目的：cyclophilin A(CypA)是CyP家族中发现最早且研究最多的，多项研究表明其与肿瘤关系密切，在多数肿瘤中呈上调表达，前期实验曾通过酵母双杂交的方法筛选出可能与CypA相互作用的蛋白，ARL6IP4(SR-25)是其中克隆数较多的一个，并且ARL6IP4与mRNA剪接相关。本实验旨在验证CypA与ARL6IP4之间是否确实存在相互作用。　　 2、方法：培养Hep3B细胞，参照脂质体转染试剂盒步骤将CypA、ARL6IP4转染进Hep3B细胞，48h后收集细胞，提取蛋白，western blot检验CypA和ARL6IP4在细胞中的表达。然后通过荧光共定位观察两者在Hep3B细胞中的定位，观察定位点是否有重叠，为进一步验证两者之间是否存在相互作用提供基础。免疫共沉淀实验旨在观察Flag-CypA是否可以被Myc-ARL6IP4“拉”下来，从而得以在体外实验中验证两者之间是否存在相互作用。　　 3、结果：western blot实验表明CypA与ARL6IP4可在肝癌细胞中表达。荧光共定位结果证明两者都定位于Hep3B细胞的细胞核中，且两者在细胞中的定位点有很好的重叠；免疫共沉淀实验结果表明CypA可以被ARL6IP4“拉”下来，从而表明CypA与ARL6IP4之间存在相互作用。　　 4、结论：体外实验表明CypA-q ARL6IP4在细胞中有共同的位点，且存在相互作用。