稻曲病菌的遗传多样性及其致病性分化测定

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稻曲病是一种积年流行病害,病害的发生与年份、地区、还有寄主材料有关,因此,本文对稻曲病的研究集中在同一年份、同一地区以及同一寄主品种上分离的稻曲病菌,分析其遗传多样性、测定其致病性分化情况和培养形状,以及三者之间的相关性,并对稻曲病菌的侵染特性以及抗病育种做出理论依据。本实验将2016年从雅安草坝镇光华村高感稻曲病菌的“蒲江6号”上采集的稻曲球,通过组织分离的方法,获得单孢菌株,将单孢菌株进行遗传多样性的分析、致病性分化测定及培养性状。主要实验结果如下:1)稻曲病菌的遗传多样性分析将分离纯化的单孢菌株通过PCR扩增将鉴定为稻曲病菌的DNA进行MLST分析。maker1扩增出的97个菌株建立遗传进化树,划分为9个遗传类群Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ。其中类群Ⅰ为优势群体,共34个,占总数的35.1%;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ类群各有2、2、10、11、4、1、8、25个,分别占总菌株数的2.1%、2.1%、10.3%、11.3%、4.1%、1%、8.2%、25.8%。maker 2扩增出的94个菌株建立分子树,划分为2个遗传类群Ⅰ、Ⅱ,分别占供试菌株的98.9%和1.1%。实验结果表明,同一年份、同一地区、同一遗传背景的寄主材料上分离的稻曲病菌之间存在遗传多样性,甚至同一稻曲球上都存在遗传差异,但大多数菌株间遗传背景相近。通过对2013年和2014年分离的菌株的遗传多样性相比较,发现在不同的年份、同一地区、同一寄主材料上分离的稻曲病菌之间存在遗传多样性,且种群遗传变异更明显、进化潜力更强。说明在近几年内,小种分布可能存在变化,产生新的类群。由于抗病品种的种植或者环境的压力造成病原菌的优势群体可能在逐步发生改变或病原菌的基因频率发生了改变。2)培养性状及产孢量测定本实验测定了50个单孢菌株的产孢量、菌落颜色以及菌落形态,结果表明,从同一穗的同一稻曲球分离的单孢菌株大多数的的产孢量之间差异不显著;从同一穗的不同稻曲球分离的单孢菌株之间差异不显著,只有少数的菌株之间有差异;而从不同稻穗之间分离的稻曲病菌的产孢量之间有的存在显著差异,有差异不差异。而将菌落颜色分为5类:白色、黄色、黄绿色、墨绿色以及黄褐色,分别占供试菌株的18%、18%、28%、28%、8%。菌落形态分为平整菌落和隆起菌落,分别占供试菌株的70%和30%。稻曲病菌的遗传多样性与培养性状及产孢量之间不存在相关性。2)稻曲病菌的致病性分化测定将从maker1的遗传类群选出的17个菌株接种到6个水稻材料上,结果表明:接种菌株在6个不同的水稻材料上均表现出了接种差异,但08R2394在92-548和蒲江6号之间差异不明显。稻曲病菌菌株间存在明显的致病性分化情况,不同菌株在不同的水稻材料上存在致病性分化,不同的菌株对同一水稻材料也存在一定的致病性分化情况,同一穗分离的菌株以及同一个稻曲球分离的菌株的也存在致病性分化情况,如:接种在在水稻材料R13149-19-1上的菌株127-2-8,其病穗率为50%,病情指数为21.33。而菌株127-2-10则表现出不同的接种效果,其病穗率为13.33%,病情指数为6.00。将每个不同遗传聚类的菌株接种到水稻材料上,每个聚类都包含不同的致病情况,病情指数和病穗率的变化与遗传聚类没有一一对应的关系。
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