中国大鲵虹彩病毒(Chinese giant salamander iridovirus,CGSIV)是从病鲵组织内提取并分离的一株新兴虹彩病毒,与III型蛙病毒、虎纹蛙病毒等同属虹彩病毒科蛙病毒属,对野生及驯养大鲵以及其他水生物种具有强致病性和高致死率,给水产养殖业带来了严重的经济损失。目前,针对CGSIV的病毒基因功能及入侵、复制机制的研究以及疫苗研制均处于起步阶段。选择合适的细胞作为宿主细胞系模型是病毒研究的重要基础,传统的鱼类细胞系存在转染效率低下、技术手段不成熟等缺陷。因此,根据虹彩病毒的宿主广泛性特征以及哺乳动物细胞系在III型蛙病毒及虎纹蛙病毒研究中的适用性,本文将人胚肾细胞系(293T)作为CGSIV的潜在宿主细胞系,通过PCR、Western Blot和透射电镜等方法,从病毒的吸附与入侵、病毒基因表达及子代病毒的组装与释放三个方面确证26℃条件下CGSIV对293T细胞具有感染性。结果表明:CGSIV能够在26℃条件下成功感染293T细胞,并在细胞内顺利完成其生活周期,产生具感染力的完整子代病毒。这为发展293T细胞作为CGSIV病毒研究的细胞系新模型提供了理论基础和现实依据。串联间隔短回文重复序列-CRISPR关联蛋白9系统(CRISPR-Cas9)是一种强大的基因编辑工具,能够精确操纵或修改特定基因,被广泛运用于动植物、细菌、酵母以及病毒等领域的研究。为确定CRISPR-Cas9技术在虹彩病毒研究中的适用性,本文通过设计特异性靶向CGSIV PCNA及18K的sg RNA,在26℃下利用CRISPR-Cas9系统在293T细胞系中对CGSIV基因组进行编辑。结果表明:CRISPR-Cas9系统能够成功对CGSIV基因组进行编辑,产生大片段缺失及短序列碱基插入突变型子代病毒,从而证明了CRISPR-Cas9系统对虹彩病毒CGSIV的有效性;同时,特异性靶定CGSIV基因组的CRISPR-Cas9系统能够显著抑制293T细胞内CGSIV的复制与增殖,使宿主细胞内子代病毒粒子大幅减少。这为减少宿主细胞内病毒粒子以及虹彩病毒疾病治疗提供了一个全新的理论基础和策略方法。