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目的:随着核技术的高速发展,电离辐射（Ionizing radiation,IR）被广泛应用于医疗、工业、农业等领域,在造福人类的同时也极大的增加了人们受到电离辐射而造成辐射损伤的概率。电离辐射可诱发机体产生慢性和急性放射综合征,包括造血、胃肠道等综合征。截止目前,氨磷汀（Amifostine）是唯一被FDA批准用于临床的辐射防护药物,但由于其毒副作用大、给药方式单一等原因限制了其在临床上的广泛应用。因此,我们急需找到一种效果好、毒性低的辐射防护药物,来减轻电离辐射对机体的损害。中草药以其多靶点、促进造血、增强免疫功能、抗氧化、保护DNA免受损伤等多种优势在辐射损伤的治疗中发挥重要的作用。黄杞叶为胡桃科黄杞属植物黄杞（Engelhardia roxburghiana Wall.）的干燥叶,是广西壮族常用的中药,具有抗动脉粥样硬化、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、保护神经功能、保护心肌缺血和脑缺血等多种药理作用。本课题组发现黄杞叶总黄酮在具有显著的体外抗氧化活性,而辐射诱导的活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平升高是导致辐射损伤的主要原因,且目前尚未发现其在辐射损伤中的相关报道。故本课题组对黄杞叶总黄酮进行了系统的辐射防护研究:黄杞叶总黄酮对致死剂量照射下小鼠的30天存活率,辐射诱导的造血系统和肠损伤的防护作用进行了研究,并初步探究了其发挥辐射防护作用的机制。方法:（1）通过DPPH和ABTS体外自由基清除实验检测黄杞叶总黄酮的体外抗氧化活性。（2）检测致死剂量照射下小鼠30天生存率,小鼠接受7.2 Gy全身照射（Total body irradiation,TBI）,辐射前7 d和照射后6 d连续灌胃给不同浓度的黄杞叶总黄酮或溶剂,记录照射后小鼠30天存活情况。（3）建立小鼠造血系统辐射损伤模型,小鼠接受4 Gy全身照射,照射前7 d和照射后6 d连续灌胃给不同浓度的黄杞叶总黄酮或溶剂。于照射后第7天处死小鼠,取外周血和单侧股骨骨髓细胞进行血常规检测,取另一侧股骨骨髓细胞检测骨髓DNA含量,取胸腺和脾脏计算脾脏和胸腺脏器指数,取肝脏检测还原型谷胱甘肽（Reduced glutathione,GSH）和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）含量。（4）建立辐射诱导的小鼠肠损伤模型,小鼠接受13 Gy全腹照射（Total abdominal irradiation,TAI）,照射前7 d和照射后2 d连续灌胃给不同浓度的黄杞叶总黄酮或溶剂。于照射后第3.5天处死小鼠,检测小鼠结肠长度,通过试剂盒检测小鼠血清中白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、GSH和SOD含量,苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin,H＆E）染色观察小肠形态,免疫组化（Immunohistochemistry,IHC）染色观察小肠隐窝干细胞、小肠绒毛及小肠隐窝细胞增殖情况,实时荧光定量聚核酶链反应（Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测小鼠肠道完整性相关基因（Glut1,Pgk1以及MDR1）的表达。（5）建立辐射诱导的体外细胞损伤模型,用CCK-8法检测不同浓度黄杞叶总黄酮对人正常肠上皮细胞HIEC-6、人结直肠癌细胞（HT29、SW620、LS174T）的毒性,克隆形成实验检测黄杞叶总黄酮的辐射防护或增敏效果,单细胞凝胶电泳实验和免疫荧光实验检测黄杞叶总黄酮对正常细胞DNA损伤的辐射防护效果,流式细胞术检测黄杞叶总黄酮对辐射前后细胞周期、细胞凋亡和细胞内ROS水平累积的影响,Western Blot分析凋亡和ROS相关蛋白的表达。结果:（1）体外自由基清除实验表明,黄杞叶总黄酮具有显著的体外抗氧化活性。（2）黄杞叶总黄酮显著提高致死剂量照射后小鼠的30天存活率。（3）黄杞叶总黄酮可以增加受照小鼠的体重,升高受照小鼠的脾脏和胸腺脏器指数,增加受照小鼠外周血白细胞（White blood cell,WBC）、红细胞（Red blood cell,RBC）、血红蛋白（Hemoglobin,HGB）和血小板（Platelet,PLT）在全血中的数量,改善中性粒细胞（Neutrophil,NE）和淋巴细胞（Lymphocyte,LY）在全血中的比例,增加受照小鼠骨髓有核细胞数（Bone marrow nucleated cells,BMNCs）、骨髓DNA含量、肝脏GSH和SOD含量。（4）黄杞叶总黄酮可以增加受照小鼠结肠长度,增加血清中IL-6、TNF-α、GSH和SOD含量,减轻肠结构性损伤,促进隐窝细胞的增殖,增加小肠隐窝干细胞的数量,并可以维持小鼠肠道的完整性。（5）黄杞叶总黄酮可以显著增强受照细胞的克隆形成能力,减少彗星尾部DNA量占全部DNA量的比例和受照细胞内γ-H2AX的焦点数,减少受照细胞的凋亡和ROS水平的累积。Western Blot结果显示,黄杞叶总黄酮显著增加受照正常细胞内抗凋亡蛋白BCL-XL和铁死亡相关蛋白GPX4的表达,抑制受照细胞内KEAP1的表达,上调NRF2的表达,并进一步激活其下游抗氧化因子HO-1、NQO1的表达。结论:本研究验证了黄杞叶总黄酮在体内外的辐射防护作用,能缓解辐射诱导的小鼠造血系统和肠损伤。黄杞叶总黄酮可能通过减少受照细胞的DNA损伤,增加BCL-XL和GPX4蛋白的表达来抑制线粒体凋亡和铁死亡,激活KEAP1/NRF2通路,缓解辐射引起的氧化应激起到辐射防护作用。为传统中药黄杞叶在辐射防护中的应用及作用机制提供了一定的参考。