益生菌对脂多糖刺激仔猪组织中氧化相关指标和有关基因表达的影响

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本文研究了复合芽孢杆菌和干酪乳杆菌对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠道、肝脏等组织损伤的缓解作用,从信号通路和抗氧化能力等方面探讨其机制。试验选取28日龄(杜×长×大)健康仔猪24头,随机分为四个处理(空白对照组、免疫应激组、复合芽孢组、干酪乳杆菌组),每个处理6个重复。空白对照组、免疫应激组饲喂基础日粮,复合芽孢组饲喂基础日粮+复合芽孢杆菌(枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌,共106cfu/g饲料),干酪乳杆菌组喂基础日粮+干酪乳杆菌(106cfu/g饲料),试验期为30天。于试验第30天,免疫应激组、复合芽孢组、干酪乳杆菌组注射100μg/kg BW的LPS,空白对照组注射等量的生理盐水。分别在注射3h后采血,6h后屠宰,取十二指肠、空肠、回肠、结肠、肝脏、脾脏、胰腺、淋巴结等样品待测。试验一:益生菌对脂多糖刺激仔猪组织基因水平的影响(1)与空白对照组相比,免疫应激组十二指肠中EGF的mRNA表达量显著下降(P<0.01);与免疫应激组相比,复合芽孢组结肠中EGFR的mRNA表达量显著升高(P<0.05),干酪乳杆菌组回肠中EGF的mRNA表达量显著升高(P<0.05);干酪乳杆菌组空肠中Ki-67、Caspase-3的mRNA表达量显著升高(P<0.05),并恢复到空白对照组水平。表明日粮中添加106cfu/g的复合芽孢杆菌或干酪乳杆菌有利于肠黏膜细胞的增殖、修复。(2)与空白对照组相比,免疫应激组十二指肠、空肠、回肠、结肠、脾脏、淋巴结中IL-4,结肠中IL-10的mRNA表达量显著降低(P<0.05),肝脏中IL-6、IL-8、TNF-α、TLR4、NOD2、NF-κB、STAT3,脾脏中IL-8、TNF-α、NOD2、NF-κB,空肠中NOD2、NF-κB的mRNA表达量显著升高(P<0.05)。与免疫应激组相比,复合芽孢组结肠中IL-10的mRNA表达量显著升高,干酪乳杆菌组空肠中NF-κB和肝脏中IL-6、IL-8的mRNA表达量显著降低(P<0.05),由此可见,日粮中添加106cfu/g的复合芽孢杆菌或干酪乳杆菌可在一定程度上缓解组织的炎性损伤。(3)与空白对照组相比,免疫应激组降低了十二指肠中occludin和pBD-2,十二指肠、空肠和回肠中AQP8的mRNA表达量(P<0.05),提高了回肠和结肠中claudin-1,结肠中CFTR和AQP8,十二指肠、空肠和回肠中pBD-1及肝脏中AMPK和HSP70的mRNA表达量(P<0.05)。与免疫应激组相比,复合芽孢组十二指肠中claudin-1和SGLT的mRNA表达量显著升高(P<0.05),空肠中pBD-1的mRNA表达量显著降低(P<0.05);干酪乳杆菌组十二指肠中AQP8的mRNA表达量显著升高(P<0.05),结肠中CFTR、AQP8的mRNA表达量显著降低(P<0.05);复合芽孢组和干酪乳杆菌组肝脏中的HSP70的mRNA表达量均显著降低(P<0.05)。以上结果表明,日粮中添加106cfu/g的复合芽孢杆菌可维持机体的肠道屏障功能,促进葡萄糖的吸收,调控机体的非特异性免疫反应;日粮中添加106cfu/g的干酪乳杆菌可维持机体的水平衡和氯离子平衡;日粮中添加106cfu/g的复合芽孢杆菌或干酪乳杆菌,有利于缓解LPS刺激对肝脏的免疫应激。试验二:益生菌对脂多糖刺激仔猪组织的氧化相关指标的影响与空白对照组相比,免疫应激组肝脏中SOD的活性降低了20.2%(P<0.01),结肠中iNOS的活性提高了63.2%(P<0.05)。与免疫应激组相比,复合芽孢组和干酪乳杆菌组肝脏中SOD的活性均显著升高(22.9%和30.9%,P<0.05)。由此可见,日粮中添加106cfu/g的复合芽孢杆菌或干酪乳杆菌可有效缓解LPS刺激对肝脏的损伤,提高肝脏的抗氧化能力。结论:日粮中添加106cfu/g的复合芽孢杆菌或干酪乳杆菌有利于肠道黏膜细胞的生长和增殖,有利于缓解机体的免疫应激;日粮中添加106cfu/g的干酪乳杆菌有利于维持机体的氯离子平衡和水平衡;日粮中添加106cfu/g的复合芽孢杆菌或干酪乳杆菌可提高肝脏的抗氧化能力。
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