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[目 的]通过构建CaMKIIγ慢病毒并转染稳定传代的大鼠肝细胞BRL-3 A,探究CaMKIIγ表达水平对大鼠肝细胞BRL-3A增殖的影响。[方 法]通过体外培养稳定传代的大鼠肝细胞BRL-3A系,构建CaMKIIγ过表达(LV-CaMKIIγ)、敲低(LV-CaMKIIγ shRNA)及相应空白载体的慢病毒体系,分别转染入大鼠肝细胞BRL-3A内并建立空白对照组。然后通过流式细胞仪检测转染效率,采用QRT-PCR法检测各组不同时间点的CaMKIIγ mRNA表达水平;Western blot法检测CaMKIIγ蛋白在各组不同时间点的表达水平;CCK-8法检测细胞生长情况并绘制生长曲线,用于检测不同时间的细胞计数;流式细胞仪法检测各组不同时间点的细胞周期。[结 果](1)各组慢病毒均成功转染入大鼠肝细胞BRL-3A内;(2)应用QRT-PCR检测结果:感染后第1天,LV-CaMKIIγ组与CON组CaMKIIγmRNA相对表达量差异有意义(P<0.01),LV-CaMKIIγ shRNA组与CON组无统计学意义(P>0.05)。感染后第 3 天、5 天、7 天,LV-CaMKIIγ组的 CaMKIIγ mRNA相对表达量明显高于CON组(P<0.05),LV-CaMKIIγshRNA组显著低于CON组(P<0.05),LV-CaMKIIγ-NC 组、LV-CaMKIIγshRNA-NC 组、CON 组间CaMKIIγmRNA相对表达量无统计学意义(P>0.05)。(3)Western blot检测结果:第1天,各组间差异无统计学意义(P>0.05);第3天,LV-CaMKIIγ组与LV-CaMKIIγ-NC组、LV-CaMKIIγshRNA组CaMKIIγ蛋白相对表达量有统计学意义(P<0.05),与 CON 组无统计学意义(P>0.05)。LV-CaMKII γshRNA 组和CON组的CaMKIIy蛋白的相对表达量有统计学意义(P<0.01)与LV-CaMKII γshRNA-NC组比较有统计学意义(P<0.05);在第5天、第7天,CaMKIIγ蛋白相对表达量LV-CaMKIIγ组与CON组有统计学意义(P<0.01),LV-CaMKⅡγshRNA 组与 CON 组有统计学意义(P<0.01),LV-CaMKIIγ-NC 组、LV-CaMKⅡγshRNA-NC 组、CON 组间无统计学意义(P>0.05)。(4)CCK-8检测结果:[V-CaMKⅡγ shRNA组细胞增殖最快,与CON组比较统计学有意义(P<0.05);LV-CaMKIIγ组细胞增殖最慢,与CON组比较统计学有意义(P<0.05);LV-CamkIIy-NC 组、LV-CaMKIIγshRNA-NC 组、CON 组间的差异不显著(P>0.05)。(5)流式细胞仪检测细胞周期结果:在G0/G1期,转染后第1天、3天、5天、7天,LV-CaMKIIγ组细胞占比明显高于CON组(P<0.05),LV-CaMKIIγ shRNA组细胞占比与CON组有统计学意义(P<0.05),其余各组间无统计学意义(P>0.05)。在S期,转染后第1天、3天、5天、7天,LV-CaMKIIγshRNA组细胞占比与CON组间有统计学意义(P<0.01),第1天、3天,LV-CaMKIIγ组与CON组细胞占比无统计学意义(P>0.05),第5天、7天,LV-CaMKIIγ组细胞占比低于CON组(P<0.01)。在G2/M期,转染后第1天,LV-CaMKIIγ shRNA组细胞占比与CON组间有统计学意义(P<0.01),LV-CaMKIIγ组与CON组细胞占比无统计学意义(P>0.05),其余三组间无统计学意义(P>0.05)。第3天、5天、7天,LV-CaMKIIγ组细胞占比明显低于CON 组(P<0.01),LV-CaMKIIγ shRNA 组与 CON 组有统计学意义(P<0.01)。[结 论]CaMKIIγ蛋白的表达水平与大鼠肝细胞BRL-3A的增殖存在密切关系;CaMKIIγ蛋白表达的敲低可以促进大鼠肝细胞BRL-3A的增殖,而CaMKIIγ蛋白的过量表达则抑制大鼠肝细胞BRL-3A增殖。