第一部分　　 目的：分离培养大鼠的ADSCs，研究其体外增殖、传代的特点以及表型特征。脂肪干细胞具有多种特异性抗原和受体，据此进行检测和分析，有助于研究脂肪干细胞该发育阶段的特性，为科学研究和临床诊治提供有用信息。　　 　　 方法：取体质量约120g的SD大鼠，分离其双侧腹股沟部的脂肪垫，经Ⅰ型胶原酶消化获得细胞，用含10％FCS的培养基培养ADSCs，以FACSCalibur流式细胞仪检测原代ADSCs和筛选标志物表达。　　 　　 结果：通过Ⅰ型胶原酶消化消化大鼠脂肪组织，可以获得纯度较高的脂肪干细胞，所得脂肪干细胞具有良好的增殖能力，能够进行传代培养并能保持其特性，我们获得的大鼠脂肪干细胞经过流式细胞仪检测CD45、CD49d、CD56呈阴性表达， CD29、CD44、CD90呈阳性表达。　　 　　 结论：1.自SD大鼠腹股沟取材可以获得纯度较高的ADSCs2.经过传代培养ADSCs的纯度可以得到进一步的提高3. ADSCs表达特异的表面分子，具备间质干细胞的特征，具有极强的自我更新能力和多向分化潜能。　　 第二部分目的：验证大鼠脂肪干细胞是否具有间质干细胞多向分化的特性，将细胞置于已知的成骨成脂诱导条件。探讨行体外培养时大鼠ADSCs成脂成骨分化的能力、ADSCs复合水凝胶培养时其体外生长繁殖能力以及复合水凝胶时成脂成骨分化能力。　　 　　 方法：在二维培养的方式下将大鼠脂肪干细胞进行成骨成脂诱导，观察其成骨成脂能力。以水凝胶为组织工程生物支架、脂肪干细胞为种子细胞，在三维立体培养物的培养基中培养进行成脂成骨诱导分化，检测ADSCs和水凝胶的相容性及诱导分化能力。　　 　　 结果：在二维培养环境中，大鼠ADSCs经过14 d的成脂诱导，出现脂肪细胞，具有成脂能力，经过14 d的成骨诱导，出现成骨细胞，具有成骨能力。在三维立体的培养环境中，其成骨成脂能力仍然存在，但完成诱导的时间较长。　　 　　 结论：1. ADSCs在二维培养环境中具有成脂、成骨能力，表现出与其他间质干细胞相似的多分化特性。　　 2.ADSCs与水凝胶具有较好的相容性，在水凝胶中能较好的增殖分裂；　　 3.ADSCs在三维培养环境（水凝胶）中具有良好的成脂成骨能力，亦保持了其原有的多分化特性。　　 第三部分目的：观察ADSCs在特定的诱导环境下成嗅鞘样细胞分化和神经发生的能力。　　 　　 方法：以transwell小室为共培养载体。无支架共培养组以脂肪干细胞接种于上室，嗅鞘细胞接种于下室，支架共培养组以脂肪干细胞联合水凝胶生物支架（BD? PuraMatrix? Peptide Hydrogel）接种于上室，嗅鞘细胞接种于下室。检测两组细胞共培养12 d后其脂肪干细胞P75的表达。　　 以水凝胶为组织工程生物支架，脂肪干细胞为种子细胞，在三维立体培养物的培养基中加入bFGF、EGF、B27，进行诱导分化。检测诱导后种子细胞Nestin/Brdu的表达。　　 　　 结果：我们研究发现，共培养12 d后无支架共培养组和支架共培养组都有部分细胞表达P75，且支架共培养组表达率更高。脂肪干细胞复合水凝胶培养10d后呈集落样分布的细胞Nestin/Brdu阳性表达，而散在分布的细胞呈nestin阴性，Brdu阳性表达。　　 结论：结合以前的研究结果，我们认为，脂肪干细胞在嗅鞘细胞生长微环境中能向嗅鞘样细胞分化；肪干细胞在水凝胶中经神经诱导后，可表达Nestin/Brdu阳性，具有神经系细胞的特征性生物学标志且具有自我增殖、更新能力。