茶树拮抗内生真菌筛选及其生物活性评价研究

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茶树,是一种重要的经济作物,然而病虫害的持续发生严重危害茶叶生产。其中茶炭疽病(Gloeosporium camelliae sinensis Miyake)和茶轮斑病(Pestealotia camelliae Sawada)就是两种重要的茶树叶部病害,会造成茶树的大量减产和茶叶品质的降低。长期以来,化学防治是针对茶树病害的主要手段,但由于其容易造成病原菌耐药性、污染生态环境、威胁人类健康等缺点的日益突出,茶园迫切需要一种可持续的植物病害防治技术。植物内生生防菌具有分泌抗菌物质、病原菌竞争营养物质和生态位以及诱导植物系统抗病性等特性,具有安全、高效等优点,具备开发成微生物药剂用于控制茶树病害的潜力,具有重要的研究价值和开发潜力。茶树内生真菌与茶树之间存在长期协同进化关系,具有环境友好、对茶树生长无危害等优点,是较为理想的茶树病原菌的生物防治资源,因此,本文开展了茶树拮抗内生真菌的筛选及其生物活性评价等研究工作。论文取得的主要研究结果如下:(1)使用组织分离法和研磨稀释法从舒茶早品种茶树根茎叶部组织中分离纯化出20株内生真菌。(2)通过平板对峙实验,以茶炭疽病病原菌(Colletotrichum gloeosporioides)和茶轮斑病病原菌(Pseudopestalotiopsis camelliae)为供试致病菌,筛选并鉴定出7株茶树拮抗内生真菌,其中耙齿菌属(Irpex lacteus)和青霉属(Penicillium ehrlichii)两种真菌为首次在茶树体内分离得到。(3)通过与多种常见植物致病真菌的平板对峙实验,发现3株(No.19、No.11和No.9)对多种植物致病菌具有拮抗活性的茶树拮抗内生真菌。(4)对高效拮抗菌株No.19进行了发酵液制备及其在不同发酵条件下抑菌活性的评价,表明发酵3 d的发酵液抑菌效果最好,且抑菌活性与发酵液浓度呈正相关。(5)通过盆栽实验评价了No.19发酵液对茶炭疽病和茶轮斑病的预防效果,研究表明发酵液比对照药剂广谱抑菌剂多菌灵的推荐剂量防效更好更稳定,研究为生防菌的应用提供了研究基础。
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