采用酸抽提、离子交换、凝胶柱层析等方法,从新生小公牛脑内分离提取到新生牛脑活性肽NBBP-1,处理人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,观察鉴定NBBP-1对人神经母细胞瘤细胞的生物学效应,并初步探索其对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的作用机理。实验结果表明,NBBP-1能有效抑制SK-N-SH细胞增殖活动,其细胞生长抑制率达88.84%。流式细胞仪检测SK-N-SH细胞经NBBP-1处理后,亚G1期细胞增多,出现G0/G1期阻滞;DNA电泳实验显示DNA降解成小片段,细胞进入凋亡。光镜、电镜观察显示经处理后的SK-N-SH细胞趋于固缩状态,细胞体积减小,核膜崩解,细胞核出现断裂现象形成核残体,异染色质增多且多为凝聚状态,细胞质空泡化明显,出现凋亡小体等典型的细胞凋亡形态和超微结构特征。免疫细胞化学观察显示,NBBP-1处理后的SK-N-SH细胞,与细胞凋亡相关的癌基因bcl-2表达下调,抑癌基因p53、fas、bax等表达上调。研究结果表明,新生牛脑活性肽NBBP-1能有效抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞恶性增殖活动,经NBBP-1处理细胞出现DNA降解和亚G1期细胞凋亡峰及典型细胞凋亡形态与超微结构特征变化,从而对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞凋亡具有显著的诱导作用。NBBP-1对SK-N-SH细胞的诱导与其下调细胞凋亡相关癌基因bcl-2和上调抑癌基因p53、fas、bax的表达从而阻滞细胞周期具有重要关系。