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目的:观察小鼠非酒精性脂肪性肝病发生过程中脂滴包被蛋白5（Perilipin5,Plin5）表达的变化及蓝莓花青素干预后对其表达的影响,探讨Plin5蛋白在蓝莓花青素干预非酒精性脂肪性肝病发生过程中可能的作用。方法:1、体外实验:培养AML12小鼠肝细胞,取对数生长期细胞分为对照组、油酸诱导组、维生素C组、蓝莓花青素组,每组设置3个复孔。对照组给予DMEM/F12培养基培养;油酸诱导组、维生素C组、蓝莓花青素组,给予含0.75mmol/L油酸的DMEM/F12培养基,培养24h,以复制小鼠非酒精性脂肪性肝病细胞模型。模型复制成功后,采用具有抗氧化活性的水溶性维生素C作为阳性对照药物;维生素C组、蓝莓花青素组分别更换含50μg/m L维生素C及50μg/m L蓝莓花青素的DMEM/F12培养基,对照组、油酸诱导组更换DMEM/F12培养基,各组均培养24h。实验结束后,采用微板法测定细胞培养上清液中ALT、AST水平以及细胞内TG含量;WST-1法检测细胞内SOD含量;TBA法检测细胞内MDA含量;油红O染色观察细胞内脂质沉积情况;Western Blot检测细胞中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白的相对表达情况;q-PCR检测细胞中Plin5 m RNA的相对表达情况。2、体内实验:将8周龄、体重25-30g、雄性ICR小鼠适应性饲养1周后随机分为对照组、非酒精性脂肪性肝病组、维生素C组、蓝莓花青素组,每组6只;对照组小鼠使用基础饲料喂养;非酒精性脂肪性肝病组、维生素C组、蓝莓花青素组小鼠使用高脂饲料喂养并腹腔注射5%CCl4,剂量2μL/g,2次/周,共10周,以复制小鼠非酒精性脂肪性肝病动物模型。模型复制成功后,维生素C组、蓝莓花青素组小鼠分别给予50μg/m L维生素C溶液及50μg/m L蓝莓花青素溶液,剂量10μL/g,隔天灌胃,共8周;对照组、非酒精性脂肪性肝病组小鼠给予等量生理盐水灌胃;灌胃期间同时对非酒精性脂肪性肝病组、维生素C组、蓝莓花青素组各组小鼠腹腔注射5%CCl4,剂量1μL/g,1次/周,以维持造模效果。实验结束后,各组小鼠乙醚麻醉,眼球取血,剪开腹腔后取肝右叶部分肝组织行石蜡切片及冰冻切片,其余肝组织-80℃冻存。采用微板法检测小鼠血清ALT、AST水平及肝组织TG含量;WST-1法检测肝组织内SOD含量,TBA法检测肝组织内MDA含量;病理切片行HE染色及油红O染色,观察肝脏组织形态学变化及脂质沉积情况;Western Blot检测肝组织中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白的相对表达情况;q-PCR检测肝组织中Plin5 m RNA的相对表达情况。结果:1、体外实验:与对照组相比,油酸诱导组的细胞培养上清液中ALT、AST水平、细胞内TG、MDA含量均升高（P＜0.05）、细胞内SOD含量降低（P＜0.05）,染色结果显示细胞内脂滴数量增加（P＜0.05）,细胞内Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均升高（P＜0.05）。与油酸诱导组相比,维生素C组、蓝莓花青素组的细胞培养上清液中ALT、AST水平、细胞内TG、MDA含量均降低（P＜0.05）,但未降至对照组水平,细胞内SOD含量升高（P＜0.05）,染色结果显示细胞内脂滴数量减少（P＜0.05）,细胞内Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均降低（P＜0.05）。与维生素C组相比,蓝莓花青素组的细胞培养上清液中ALT水平、细胞内TG、MDA含量均降低（P＜0.05）,细胞内SOD含量升高（P＜0.05）,染色结果显示细胞内脂滴数量进一步减少（P＜0.05）、细胞内Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均降低（P＜0.05）。2、体内实验:与对照组相比,非酒精性脂肪性肝病组的小鼠血清ALT、AST水平、肝组织中TG、MDA含量均升高（P＜0.05）、肝组织中SOD含量降低（P＜0.05）,病理结果显示肝组织出现明显空泡变性及脂质沉积,肝组织中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均升高（P＜0.05）。与非酒精性脂肪性肝病组相比,维生素C组、蓝莓花青素组的小鼠血清ALT、AST水平、肝组织中TG、MDA含量均降低（P＜0.05）,但未降至对照组水平,肝组织中SOD含量升高（P＜0.05）,病理结果显示肝组织空泡变性及脂质沉积得到改善,肝组织中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均降低（P＜0.05）。与维生素C组相比,蓝莓花青素组的小鼠血清ALT、AST水平、肝组织中TG、MDA含量降低（P＜0.05）,肝组织中SOD含量升高（P＜0.05）,病理结果显示肝组织空泡变性及脂质沉积得到进一步改善。肝组织中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量及Plin5m RNA相对表达量均降低（P＜0.05）。结论:1、Plin5参与了小鼠非酒精性脂肪性肝病发生过程中脂滴的形成。2、蓝莓花青素可以通过提高抗氧化能力改善小鼠非酒精性脂肪性肝病。3、蓝莓花青素可能通过影响肝细胞内PI3K/Akt信号通路调控的Plin5蛋白的表达,进而减少了肝细胞内脂滴的形成。