脉冲染料激光与Nd:YAG激光对体外人成纤维细胞的影响

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目的:控讨脉冲染料激光和Nd:YAG激光临床治疗浅表血管性皮肤病时,出现瘢痕愈合的能量范围;探讨两种激光治疗病理性瘢痕时,抑制瘢痕组织增殖的能量范围。方法:培养HT1080;用不同能量的PDL及Nd:YAG激光分别照射HT1080,继续培养24小时;采用四甲基偶氮唑蓝比色实验(MTT法)检测HT1080的增殖活性;采用ELISA法检测TGF-β1及TGF-β3的表达水平;培养小鼠;用不同能量的PDL及Nd:YAG激光分别照射小鼠皮肤;照射前、照射后24小时后及照射7天后分别病理取材,对比照射前后病理改变。结果:1、PDL与Nd:YAG激光分别照射HT1080,继续培养24小时,与对照组比较,细胞增殖活性,在不同能量实验组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2、PDL与Nd:YAG激光分别照射HT1080,继续培养24小时后,与对照组比较,不同能量实验组TGF-p.浓度均有增加,差异有统计学意义(P<0.05),其中PDL组不同能量之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);Nd:YAG组不同能量之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)3、PDL与Nd:YAG激光分别照射HT1080,培养24小时后,与对照组比较,TGF-β3浓度不同能量实验组均有增加,差异有统计学意义(P<0.05);PDL的TGF-β3浓度,不同实验组之间比较,部分差异有统计学意义(P<0.05):Nd:YAG激光TGF-β3浓度,不同实验组之间比较,部分差异有统计学意义(P<0.05),其随能量增高,呈上升趋势。4、病理切片:与对照组(正常小鼠皮肤)相比,用PDL激光以能量密度为7、15J/cm2照射小鼠后24小时,其病理表现为小鼠表皮无烧伤坏死组织,真皮层可见嗜中性粒细胞分布;39J/cm2照射后其表皮有烧伤坏死组织,真皮层较多嗜中性粒细胞分和;Nd:YAG激光以能量密度为15J/cm2照射小鼠后24小时,其病理表现为表皮无烧伤坏死组织,真皮层仅见少量淋巴细胞分布;55J/cm2照射后其表皮有烧伤坏死组织,真皮层较多嗜中性粒细胞分布;175J/cm2照射后可见有穿透真皮层烧伤坏死组织,真皮层大量嗜中性粒细胞分布。PDL激光照射小鼠后7天,其病理表现为随能量增高,真皮的纤维母细胞增生表现明显;Nd:YAG激光照射小鼠后7天,其病理表现为低能量时,随能量增高,真皮的纤维母细胞增生表现明显,但达至175J/cm2时,纤维母细胞增生表现减轻。PDL以能量密度为39J/cm2照射后,与Nd:YAG激光以能量密度为55J/cm2、175J/cm2照射后病理比较,表皮与附属器之间距离较宽,表明PDL促纤维化作用明显。结论:1、在实验能量范围内,不同能量PDL与Nd:YAG激光分别照射HT1080后,其MTT值无统计学意义,表明两种激光照射,对人成纤维细胞的增殖活性没有影响。表明在一定能量范围内,PDL与Nd:YAG激光均不会有造成瘢痕增加的风险。2、在实验能量范围内,不同能量PDL照射后,均可促进TGF-β1和TGF-β3的分泌,考虑应用PDL治疗皮肤病时,人成纤维细胞促进和抑制纤维化作用均存在,结合动物实验表明,PDL相对安全,正常能量范围内使用,不表现促进瘢痕增殖,也不表现抑制瘢痕组织增殖。因此,使用PDL治疗浅表血管性皮肤病时,在注意皮肤色素因素下,可适当使用较大能量。在治疗病理性瘢痕时,不适于血管组织少的陈旧性瘢痕。3、在实验能量范围内,不同能量Nd:YAG激光照射后,均可促进TGF-β1和TGF-p3的分泌。不同实验组之间,TGF-β1浓度无统计学意义(P>0.05), TGF-β3浓度差异有统计学意义(P<0.05),随能量增高,呈上升趋势。结合动物实验表明,Nd:YAG激光治疗皮肤病时,在较低能量范围内,不表现促进瘢痕增殖,也不表现抑制瘢痕组织增殖。随着能量逐渐增高,逐步表现抑制瘢痕组织增殖。因此,使用Nd:YAG激光治疗浅表血管性皮肽病时,能量不应过高;在治疗病理性瘢痕时,适用于各种类型瘢痕,而且能量越高,效果越好。
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