硝化细菌的分离筛选及其在养殖废水处理中的应用

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硝化细菌(Nitrifying bacteria)有广义和狭义之分,广义的硝化细菌包括氨氧化菌和亚硝酸盐氧化菌,狭义的硝化细菌专指亚硝酸盐氧化菌。亚硝酸盐氧化菌(Nitrite-oxidizing bacteria,NOB)是一类以亚硝酸盐为唯一能源、以二氧化碳作为主要碳源的革兰氏阴性细菌,催化硝化作用的第二步,即将亚硝酸盐氧化为硝酸盐,在废水处理,尤其是养殖废水处理中具有重要的生态价值和应用价值。为了筛选更加适应养殖环境,且具有高效亚硝酸盐氧化活性的硝化细菌菌株。从舟山近海大黄鱼养殖池塘水样中分离得到一株具有亚硝酸盐氧化活性的细菌ZS-1,基于16SrDNA及亚硝酸氧化酶基因的序列分析,初步判定ZS-1为维氏硝化杆菌(Nitrobacterwinogradskyi)。首先,考察了养殖环境中重要的环境因子(包括pH、温度、三态氮浓度)对其亚硝酸盐氧化活性的影响。之后,利用新型复合载体对菌株ZS-1进行固定,确定挂膜条件,考察了水力停留时间对亚硝酸盐去除率的影响,并进行对虾养殖水处理。结果表明:好氧条件下,菌株ZS-1氧化亚硝酸盐的最佳pH范围为7~9,pH小于6.5或大于10时,其活性受到明显抑制;亚硝酸盐氧化的适宜温度为25℃~32℃,低温明显延长了其适应期,但对其最大氧化速率基本没有影响;当环境中铵态氮浓度大于25mg/L时,菌株ZS-1的活性受到抑制,但低浓度的铵态氮对其活性有促进作用,促进作用随铵态氮浓度的升高而降低;硝酸盐浓度大于100mg/L时,其活性受到抑制,抑制作用随浓度增加而增强;高浓度的亚硝酸盐(500mg/L)对其活性没有影响。固定化实验结果表明,新型载体可以较好地固定亚硝酸盐氧化菌,在水力停留时间为12h、6h、3h、1h的条件下,亚硝酸盐的最大去除率分别为100%、98.77%、90.59%、59.02%。在水力停留时间为1h时,固定化的亚硝酸盐氧化菌能够高效去除养殖水体中的亚硝酸盐,去除率达76.94%。
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