IFN-λ1-3mRNA实时荧光定量PCR方法的建立及IFN-λ1的表达与呼吸道病原的关系的初探

来源 :南华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuliner
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一部分:IFN-λ1-3mRNA实时荧光定量PCR方法的建立
  目的:
  建立人IFN-λ1-3型mRNA实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测方法。
  方法:
  根据人IFN-λ1-3型mRNA的基因序列合成特异性引物及探针,用体外转录方法制备IFN-λ1-3的mRNA标准品,建立人IFN-λ1-3型mRNA实时荧光定量PCR检测方法。
  结果:
  IFN-λ1-3型mRNA的载量与对应的CT值有良好的线性关系;扩增效率均在90%-100%之间;灵敏度分别是:1×100copies/μL、1×101copies/μL、1×101copies/μL;变异系数均小于2%;各型间无交叉反应。
  结论:
  成功建立了IFN-λ1-3型mRNA实时荧光定量PCR检测方法。
  第二部分:IFN-λ1的表达与呼吸道病原的关系的初探
  目的:
  了解呼吸道上皮细胞中IFN-λ1表达水平与呼吸道病原之间的关系,为开拓儿童呼吸道病毒感染新的治疗方法提供基础数据和科学根据。
  方法:
  1.采集郴州地区2013年7月~2014年6月为期一年间就诊于郴州市第一人民医院儿科的急性呼吸道感染住院患儿鼻咽拭子标本共489份,并按照年龄及标本采集日期配对的原则,同时在该院儿保门诊收集健康儿童鼻咽拭子244份为设为对照组,将收集的鼻咽拭子加入2ml病毒保存液并置于-80℃冰箱保存。
  2.采用所建立的荧光定量PCR方法检测样本中IFN-λ1mRNA、管家基因甘油醛-3-磷酸脱酶(glyceraldehyde-3 -phosphate dehydrogenase GAPDH)mRNA,另外同时对本批标本进行常见病原(常见呼吸道病毒18种,细菌11种)进行筛查。
  3.比较不同病原感染患儿鼻咽拭子标本中IFN-λ1的表达差异。
  结果:
  1.病例组中IFN-λ1表达水平明显高于对照组(t=2.276P=0.027)。
  2.病毒感染病例中IFN-λ1的总体表达水平与正常对照组无显著差异(t=0.57P=0.57),但是RSV感染的病例中IFN-λ1的表达量明显高于正常对照组(t=2.25P=O.026),IFN-入1的表达量与RSV的载量无明显相关性(r=0.12P=0.41)。
  3.检出HRV感染的病例组中IFN-λ1的表达量较检出HRV感染的对照组显著明显升高(t=2.8P=0.015)。
  4.RSV感染的病例中IFN-λ1的表达量较HRV显著升高(t=2.19P=0.045)。
  5.细菌感染病例IFN-λ1表达水平与正常对照组比较无显著差异(t=0.17P=0.87)。
  结论:
  1.IFN-λ1参与了呼吸道病毒感染的发病过程;
  2.RSV可以诱导IFN-λ1表达且强于HRV;
  3.呼吸道细菌感染可能对IFN-λ1表达无明显诱导作用。
其他文献
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在胎盘组织中的表达以及其与妊娠期糖尿病发病机制的相关性  方法:选择2013年5月至2014年5月在青岛市市立医院住院分娩的孕妇共100例,其中50例为妊娠期糖尿病孕妇,50例为正常孕妇并设为健康对照组。采用实时定量逆转录-聚合酶链反应方法检测100例胎盘组织中GRP78mRNA的相对表达量;采用免疫组织化学方法检测胎盘组织GRP78蛋白的表达情况  结果
学位
目的  观察脑源性神经生长因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶受体B(TrkB)在子宫内膜癌中的表达,并分析其临床意义。  方法  采用免疫组织化学染色方法对11例正常子宫内膜、16例增生子宫内膜、31例子宫内膜癌组织进行BDNF及其受体TrkB表达的检测,并分析子宫内膜癌组织中BDNF、TrkB的表达与其临床病理特征的关系。  结果  1.BDNF及TrkB在正常子宫内膜中呈阴性或弱阳性表达,在增
目的:探讨左炔诺孕酮宫内缓释系统(LNG-IUS)治疗子宫内膜单纯性增生合并子宫肌瘤的临床效果及不良反应.  方法:选择在青岛大学附属医院妇科门诊诊断为子宫内膜单纯性增生患者30例,子宫内膜单纯性增生合并子宫肌瘤的患者25例,年龄在26-51岁之间,于诊刮术后第5天(病理确诊后)放置左炔诺孕酮宫内缓释系统,分别于术后3、6、12个月复查.观察患者月经量变化,月经量按PBAC法进行评分,测定血红蛋白
学位
目的:  比较CBA/J雌鼠分别与正常BALB/c雄鼠以及输精管结扎BALB/c雄鼠交配后0.5-4.5天主动脉旁淋巴结(PALN)内Treg细胞表达频率的变化规律,探讨妊娠早期小鼠精浆对雌鼠生殖道局部Treg细胞表达频率的调节作用。  方法:  以未交配动情期CBA/J雌鼠为对照,流式细胞术检测CBA/J与正常BALB/c雄鼠及与输精管结扎BALB/c雄鼠交配后0.5/1.5/2.5/3.5/4
学位
目的:  通过研究窖蛋白-1(caveolin-1,CAV-1)在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌中的表达,探讨其与鼻腔鼻窦鳞状细胞癌临床病理因素的相关性。  方法:  分别采用免疫组织化学方法及原位杂交技术检测62例鼻腔鼻窦鳞状细胞癌与20例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤及15例正常下鼻甲粘膜组织中CAV-1mRNA及蛋白的表达情况,分析CAV-1与鼻腔鼻窦鳞状细胞癌患者的临床病理参数之间的关系。  结果:  CAV
目的:近年来,肺癌发病率呈现上升趋势,由于肺癌的高转移及复发率,术后患者的生存率很低,并且肺癌的死亡率在各种恶性肿瘤的死亡率中高居首位。尽管随着分子生物学技术和临床诊疗技术水平的快速发展,对肺癌的基础研究及临床诊疗手段有了长足的进展,但目前我们对肺癌发病及发展机制的认识仍然不足,临床上一直以来仍缺乏有效的预防和早期诊断肺癌的策略,在肺癌的预后方面也处在一个相对较早的一个阶段。我们知道导致肺癌最终死
目的:Slug作为转录因子Snail家族成员之一,是E-cadherin的抑制转录因子。本研究探讨Slug在胸腺瘤中的表达及临床意义。  方法:应用免疫组织化学SP法,检测100例胸腺瘤组织及60例组织学上正常胸腺组织中Slug的表达情况,分析Slug的表达与临床病理因素的关系。  结果:Slug在胸腺瘤中的阳性表达率51%[51/100],而在正常胸腺组织中阳性表达率15%[9/60],差异有统
学位
目的:初步评估临床中非小细胞肺癌(NSCLC)患者术前常用的强化CT及PET-CT检查对诊断纵隔淋巴结转移的准确性及优缺点,以期待提高对NSCLC患者疾病进展程度评估的准确性,为临床医师治疗方案提供依据,从而改善患者预后情况。方法:以65例在青岛大学附属医院胸外科中接受术前强化CT及PET-CT检查并施行肺叶切除术及系统性淋巴结清扫术治疗的NSCLC患者作为研究对象,以术后病理诊断作为金标准,评估
目的  探讨18F-FDGPET/CT显像在儿童实体瘤中的应用价值。  方法  回顾性分析青岛大学附属医院小儿血液科2010年11月至2014年9月之间资料完整的疑诊或确诊儿童实体瘤病例96例,恶性82例,良性14例,所有病例均经病理最终确诊,患儿均进行18F-PET/CT检查及CT检查。探讨18F-FDG标准摄取值(standard uptake value,SUV)在儿童良恶性实体瘤、恶性实体
背景:慢性肾脏病(chronickidneydiseaseCKD)是目前对全世界公共卫生安全影响最大的主要疾病之一。随着慢性肾脏病的进展,最终成为终末期肾脏疾病(end-stagerenaldisease,ESRD)。ESRD患者的治疗最终需要肾脏替代治疗,血液透析为肾脏替代治疗最常用的治疗方法。来自中国血液净化病例信息登记系统数据显示,截至2017年底,全国血液透析患者为51万人,较2016年新
学位