基于溶酶体、核苷酸检测的荧光探针的设计、合成及生物活体成像研究

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细胞组成了生命,在细胞的分化、代谢和衰老过程中,核苷酸无处不在。它可以改善机体功能、增强器官的自身调节能力。探针可以用来定位细胞中的小分子,研究细胞内的氧化还原反应,细胞的分裂和凋亡,还可以检测病毒-细胞融合的过程,分析细胞膜表面的分子结构性质等等。因此,用来定位细胞内小分的探针对于人们理解和分析细胞器内的生物进程是很有必要的。为了专一高效地识别生物分子和细胞器,我们开展了以下工作:1)设计合成了一个基于香豆素衍生物的化合物1,通过活体成像研究说明探针1可以检测外源性和内生性的H2S。通过对Hela细胞和C. elegans线虫H2S检测的共定位分析实验发现探针和商业化的溶酶体染料具有较高的Pearson系数和重叠系数。探针1是第一个含有二硫键香豆素衍生物的追踪黑腹果蝇体内H2S富集情况的探针,也是第一个追踪基因突变的线虫(srp-6)体内溶酶体破裂的探针。2)设计合成了一个基于1,8-萘酰亚胺衍生物的化合物NUH1,将其用于识别核苷酸UDP。NUH1与核苷酸的尿苷通过氢键作用结合,具有响应速度快、灵敏度高的特点。实验证明在DMSO体系下加入UDP,溶液荧光增强了10倍,探针溶液本身荧光由无色到加入UDP后变成明亮的蓝色荧光。并且将NUH1成功应用到生物体成像之中。实现了对Hela细胞和C. elegans线虫内UDP的检测。
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