目的：研究大理地区肠杆菌科产β-内酰胺酶细菌耐药性及其所致感染性疾病以及blαTEM-lD型耐药基因流行情况,指导临床应用抗生素。方法：(1)肠杆菌科产β-内酰胺酶耐药菌种收集、鉴定及产酶株的定性检测：从大理学院附属医院、大理州医院、大理市第一医院选取临床分离的肠杆菌科产β-内酰胺酶耐药菌(至少对1种β-内酰胺类抗生素耐药),用全自动微生物鉴定仪(VITEK)鉴定到种。然后用头孢哨噻吩滤纸片法(nitrocefin test)对每株细菌检测是否为产β-内酰胺酶菌株。每株菌试验以后转种于盛有羊血的2ml EP管中孵育16～20小时后置于-70℃冰箱保存备用。(2)抗菌药物敏感性试验：用MIC法(微量稀释法)对耐药菌选用8种β-内酰胺类抗生素进行药敏试验,统计多重耐药情况、各种抗生素的耐药率及何种菌株为主。(3)blαTEM-lD耐药基因检测(PCR法)：提取耐药菌株中的质粒DNA,设计好引物,扩增目标DNA,用琼脂糖电泳,用Mark标记量出扩增子的大小(bp的长度),标准PCR扩增再用琼脂糖电泳分析扩增子的大小,以检测是否含有blαTEM-lD耐药基因。并统计blαTEM-lD耐药基因的比率。(4)所致感染性疾病：查阅临床病历资料,进行回顾性分析标本来源、细菌与临床疾病的关系。结果与结论：(1)本组试验肠杆菌科细菌有埃希菌属64株(全为大肠埃希菌)、克雷伯菌属41株(肺克39株、产酸克2株),肠杆菌属16株(聚团肠4株、产气肠1株),沙雷菌属8株(液化沙7株、粘质沙1株),沙门菌属3株(甲型副伤寒杆菌2株、伤寒杆菌1株),志贺菌属2株(福氏志贺菌2株),变形杆菌属1株(奇异变形杆菌1株),摩根菌属1株(摩氏摩根菌1株),耶尔森菌属1株(结肠耶尔森氏菌1株)。9个菌属、14个菌种,共137株。缺乏枸橼酸杆菌属标本。大肠埃希菌分离率最高,其次是克雷伯菌。大理学院附属医院52株、大理州医院33株、大理市第一医院52株。β-内酰胺酶检测均呈阳性(红色)反应,均为产酶株。(2)本次试验多重耐药严重,二重以上耐药占88.7%。由高到低依次为：三重耐药19.0%、二重耐药18.2%、五重耐药14.6%、六重耐药12.4%、四重耐药11.7%、七重耐药11.7%、八重耐药1株,占0.7%。三重耐药最严重,八重耐药最少。各种β-内酰胺类抗生素耐药率不同,氨苄西林与头孢呋辛耐药率较高,在本地区已不宜使用。泰能耐药率较低,在本地区仍然有效。其它5种有不同程度的耐药,但在进行药敏试验后选择性使用仍然有效。(3)本组试验blaTEM-1D型耐药基因阳性62株,比率为45.3%(62/137)。其中大肠埃希菌31株,比率为22.7%(31/137)；肺炎克雷伯菌18株,比率为13.2%(18/137)。其它较少。blαTEM-lD型耐药基因在本地区各家医院间存在水平传播和医院内垂直传播。(4)本次试验标本来源广泛,痰、尿、粪、血液、脓液、体表分泌物、胆汁、腹水、胸水、脑脊液、静脉导管、咽拭子等。标本来源主要以痰(43.1%)、尿(20.4%)为主,主要导致呼吸(51.8%)、泌尿(20.4%)系统感染,致病菌主要是大肠埃希菌(46.7%)、克雷伯菌(29.9%)。导致血液感染主要是大肠埃希菌,中枢神经系统感染是肺炎克雷伯菌,创伤和外科感染主要是大肠埃希菌。呼吸道感染主要是克雷伯菌和大肠埃希菌。消化道感染为炎克雷伯菌、福氏志贺菌、大肠埃希菌、沙雷菌。尿路感染主要是大肠埃希菌。本次试验肠杆菌科细菌与各临床科室关系密切,但主要是呼吸内科、ICU、泌尿内科、普外科等。呼吸内科以克雷伯菌、大肠埃希菌为主；泌尿内科以大肠埃希菌为主；ICU以大肠埃希菌、克雷伯菌为主,主要的原因是该科患者病情危重、机体免疫力低下、使用呼吸机、长期大量使用抗生素导致菌群失调引起感染。普外科以大肠埃希菌为主,主要为化脓性感染。本次试验的另一个特点是：1.变形杆菌、摩根杆菌常导致泌尿道感染,结肠耶尔森菌为消化道感染的病原体,本组实验却发现奇异变形杆菌、摩氏摩根杆菌、结肠耶尔森菌各1株引起呼吸道感染,较少见。2.克雷伯菌常引起呼吸道、泌尿道和创伤感染,沙雷菌常引起肺炎、泌尿道感染、败血症和外科术后感染,本组实验也发现克雷伯菌2株、沙雷菌1株引起消化道感染,情况少见。因病例数量少,故未作进一步分析。