【摘 要】
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目的探究内热针作用于兔膝骨性关节炎（knee osteoarthritis,KOA）,对软骨下骨中I型胶原（Collagen-1,COL-1）、基质金属蛋白酶-3（Metalloproteinases-3,MMP-3）、骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）表达的影响并探讨其可能的作用机制。方法1.实验动物分组及模型建立:30只无特定病原体（specific-pathogen-free,SPF
【基金项目】
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国家自然科学基金《基于OPG/RANKL/RANK通路研究回医烙灸对膝骨性关节炎软骨下骨重建的作用机制》（项目编号:81860893）；
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目的探究内热针作用于兔膝骨性关节炎（knee osteoarthritis,KOA）,对软骨下骨中I型胶原（Collagen-1,COL-1）、基质金属蛋白酶-3（Metalloproteinases-3,MMP-3）、骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）表达的影响并探讨其可能的作用机制。方法1.实验动物分组及模型建立:30只无特定病原体（specific-pathogen-free,SPF）的新西兰兔运用随机数字表法,分为空白组（10只）、模型组（20只）。采用经典Hulth方法选取模型组兔左后肢膝关节进行KOA造模。造模完成后再对模型组进行随机数字分组,分为模型组（10只）和治疗组（10只）。2.干预方法:治疗组选取兔左后肢膝关节髌下正中点1点及髌上正中点与肢体纵轴的垂直线两侧各1点、内外膝眼各1点为进针点进行内热针疗法干预,1次/周,20min/次,7d为一个疗程,共计4个疗程。空白组和模型组不进行任何治疗。3.观察指标:使用改良版Lequesne MG量表用来评估各组实验兔干预前后行为学改变。采用甲苯胺蓝染色（toluidine blue staining,TBS）观察各组实验兔膝关节软骨下骨组织形态学变化;分别采用蛋白免疫印迹法（Western blot,WB）和实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,q RT-PCR）检测3组软骨下骨中COL-1、MMP-3、OPN蛋白及其m RNA的表达。结果1.干预前与空白组相比,模型组和治疗组行为学评分显著升高（P<0.05）;干预后与模型组相比,治疗组行为学评分组间差值变化明显,有统计学差异（P<0.05）。2.干预前与空白组相比,模型组软骨下骨骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数目明显降低（P<0.05）,骨小梁弥散度明显升高（P<0.05）。干预后与模型组相比,治疗组软骨下骨骨小梁面积百分数,骨小梁数目明显升高（P<0.05）,骨小梁弥散度明显降低（P<0.05）,骨小梁厚度变化差异无显著性意义。3.干预前与空白组相比,模型组COL-1蛋白及其m RNA表达水平显著降低（P<0.001）,MMP-3、OPN蛋白及其m RNA表达水平显著升高（P<0.001）。干预后与模型组相比,治疗组COL-1蛋白及其m RNA表达水平显著升高（P<0.05）,MMP-3、OPN蛋白及其m RNA表达水平显著降低（P<0.05）4.COL-1含量变化与骨小梁面积百分数、骨小梁数目呈正相关关系,与骨小梁弥散度呈负相关关系。OPN、MMP-3和OPN/MMP-3比值变化与骨小梁面积百分数、骨小梁数目呈负相关关系,与骨小梁弥散度呈正相关关系。结论内热针疗法可改善兔KOA行为学和软骨下骨微结构变化,其机制可能是通过上调COL-1表达和下调MMP-3、OPN表达而实现。
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