2020年全球女性乳腺癌发病率已经超过肺癌,成为最常见的癌症,尽管肺癌是癌症死亡的主要原因,但世界范围内乳腺癌的发病率和死亡率仍处于较高水平。因此,研究乳腺癌的分子机制,了解乳腺癌遗传和表观遗传变化,发现新的诊断和治疗策略仍是当务之急。作为一种新发现的非编码RNA（ncRNA）,环状RNA（circRNA）通过特定的生物发生,高稳定性和独特的功能迅速成为了肿瘤研究领域的一个热点方向。本研究以环状RNA hsa＿circ＿0007766为研究对象,探讨其在乳腺癌发生发展中的作用及机制,以期为乳腺癌的诊断和治疗提供新思路。目的探讨环状RNA hsa＿circ＿0007766在人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移中的作用和潜在分子机制。方法1.通过GEO数据库或生物信息学软件分析筛选确定circRNA,下游miRNA以及相关靶基因,双荧光素酶报告基因检测验证靶向关系;2.qRT-PCR分别检测三者在正常人乳腺上皮细胞MCF10A与乳腺癌细胞株（分别为MDA-MB-231、MDA-MB-453、BT-549、HCC38和MCF7）中的表达;3.平板克隆形成实验,MTT实验、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验分别检测三者对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响;4.Western-blot实验检测靶基因、增殖相关蛋白PCNA、上皮间质转化（EMT）相关蛋白E-钙黏蛋白（Ecadherin）和波形蛋白（Vimentin）的蛋白表达水平;5.应用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和qRT-PCR分别检测乳腺癌细胞株中miRNA启动子的甲基化状态以及5μM和10μM地西他滨（DAC）处理后乳腺癌细胞中启动子的甲基化状态和miRNA的表达水平;6.进一步验证circRNA,下游miRNA以及相关靶基因三者之间的相互作用。结果1.通过生物信息学分析相关文献以及GEO数据库筛选出hsa＿circ＿0007766,qRT-PCR检测其在乳腺癌细胞株中高表达,沉默后可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF7的增殖、迁移和侵袭,Western blot结果显示沉默hsa＿circ＿0007766抑制PCNA和Vimentin的蛋白表达,促进E-cadherin的蛋白表达（P<0.05）;2.利用生物信息学软件分析确定与hsa＿circ＿0007766有结合位点的miR-1301-3p作为后续研究对象,qRT-PCR检测发现miR-1301-3p在乳腺癌细胞中表达下调,其过表达可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭以及PCNA和Vimentin的表达,同时促进E-cadherin的表达（P<0.05）;3.MSP结果显示,与正常乳腺上皮细胞MCF10A相比,乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF7中miR-1301-3p基因启动子区呈高甲基化水平;经5μM和10μM DAC处理乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF7 48h后,miR-1301-3p基因表达水平较对照组显著升高（P<0.001）,从而猜测miR-1301-3p的低表达可能与甲基化调控有关;4.通过生物信息学软件分析筛选和甲基化检测结果选定miR-1301-3p其一靶基因DNA甲基转移酶3B（DNMT3B）进行后续研究,双荧光素酶报告基因检测进一步证实miR-1301-3P与DNMT3B之间存在靶向结合位点,qRT-PCR结果显示,DNMT3B在乳腺癌细胞系中高表达,沉默DNMT3B可促进miR-1301-3p的表达,同时抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力（P<0.05）;5.共转染si-hsa＿circ＿0007766+miR-1301-3p inhibitor和sh-DNMT3B+miR-1301-3p inhibitor均可逆转si-hsa＿circ＿0007766和sh-DNMT3B对乳腺癌细胞的增殖,迁移和侵袭的抑制作用,Western blot结果显示共转染si-hsa＿circ＿0007766+miR-1301-3p inhibitor均可逆转si-hsa＿circ＿0007766和sh-DNMT3B对PCNA和Vimentin蛋白表达的抑制作用,与此同时,逆转si-hsa＿circ＿0007766对E-cadherin蛋白表达的促进作用（P<0.05）。结论综上所述得出,hsa＿circ＿0007766通过海绵吸附miR-1301-3p,调控DNMT3B的表达,进而促进乳腺癌细胞的增殖,迁移和侵袭。另外miR-1301-3p的表达又受DNA甲基化调控,且与DNMT3B之间存在反馈调节。因此可通过沉默hsa＿circ＿0007766以及使用DAC联合治疗,以期达到抑制乳腺癌细胞增殖,迁移和侵袭的作用,从而为乳腺癌的治疗提供新的研究思路。