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目的：对一例病因不明败血症患者外周血中病原菌进行分离及鉴定,同时了解分离菌株耐药性并分析耐药相关基因。方法：采集双份败血症患者外周血标本分离划线接种于血平板上,370C常规培养24 h。挑取单个菌落用革兰染色镜检以及VITEK2-compact全自动细菌检测分析系统进行菌种鉴定,然后采用16S rRNA基因PCR及产物测序进一步确定菌种鉴定结果。采用微量二倍稀释法对分离菌株进行药物敏感试验。采用β-内酰胺酶、超广谱p-内酰胺酶确证试验以及AmpC酶和碳青霉烯酶表型试验,了解分离菌株产酶情况及类型。采用PCR分别检测肠杆菌科细菌19种常见β-内酰胺酶或超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶和碳青霉烯酶基因以及21个注释为解甘露醇罗尔斯顿菌β-内酰胺酶基因（GenBank Accession No.:CP010799, CP010800, AJ270257）,扩增产物T-A克隆后测序。结果：上述血标本中分离出同一革兰阴性短杆菌,VITEK2-compact全自动细菌检测分析系统及其GN细菌鉴定卡鉴定为解甘露醇罗尔斯顿菌,鉴定值=99%,鉴定编码4003611303500001。PCR及其产物测序结果显示,该解甘露醇罗尔斯顿菌分离菌株16S rRNA基因扩增片段核苷酸序列与GenBank中公布的相应基因序列（Accession No.:AJ270257）相似性为100%。解甘露醇罗尔斯顿菌分离株对头孢曲松、头孢吡肟、环丙沙星、左旋氧氟沙星、替加环素、复方新诺明敏感,但对头孢他啶、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、美罗培南、氨曲南、庆大霉素、阿米卡星、呋喃妥因耐药。所有19种肠杆菌科细菌常见耐药相关酶类基因PCR扩增结果均为阴性,但可扩增出TK4909850、TK4912955、TK4914470、TK4914495、TK4918990五个解甘露醇罗尔斯顿菌β-内酰胺酶基因条带。与GenBank中相应解甘露醇罗尔斯顿菌β-内酰胺酶基因序列（Accession No.:CP010799, CP010800, AJ270257）比较,解甘露醇罗尔斯顿菌分离株TK4909850、TK4912955、TK4914470、TK4914495、TK4918990β-内酰胺酶基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达96.2%（737/766）和96.2%（251/261）、97.3%（838/861）和99.0%（283/286）、100%（795/795）和100%（264/264）、97.5%（980/1005）和98.8%（330/334）、97.5%（807/828）和97.1%（267/275）,但与上述肠杆菌科细菌常见β-内酰胺酶或超广谱β-内酰胺酶基因序列相似性很低。结论：该败血症患者感染的病原体为罕见的解甘露醇罗尔斯顿菌。该解甘露醇罗尔斯顿分离菌株有较高耐药性但对不同β-内酰胺类抗生素耐药性有较大差异,其β-内酰胺酶基因与肠杆菌科细菌常见β-内酰胺酶基因完全不同。