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目的:检测Hsa-miR-34a在人乳腺癌组织与癌旁组织及在乳腺癌细胞与正常乳腺上皮细胞中的表达差异,研究其对乳腺癌细胞系增殖、迁移和侵袭的影响,并预测miR-34a可能的靶基因,为阐明miR-34a在乳腺癌发生发展中的作用及调控机制提供理论依据。方法:1.通过实时荧光定量PCR方法检测miR-34a在20例人乳腺癌组织与对应的癌旁正常组织(距离癌组织边缘>5cm)以及其在人乳腺癌细胞系MDA-MB-231、 MCF-7与正常乳腺上皮细胞MCF-10A中表达量的差异。2.体外利用脂质体转染技术将miR-34a mimic转染至乳腺癌细胞,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。3.运用靶基因预测软件(TargetScan、PicTar、miRanda)共同预测并分析miR-34a可能的靶基因。结果:1.miR-34a在人乳腺癌组织中的表达量低于癌旁正常乳腺组织(P<0.01);在MDA-MB-231、MCF-7中的表达均低于MCF-10A(P<0.01),在MDA-MB-231中的表达量低于MCF-7(P<0.01)。2.与转染miR-NC (Negtive control)组相比,转染miR-34a mimic组的MDA-MB-231和MCF-7增殖能力均下降(P<0.05)。3.MDA-MB-231和MCF-7转染miR-34a mimic后迁移数分别为(286±42)个和(87±8)个分别较miR-NC组(1037±83)个和(266±12)个减少(P<0.01),侵袭细胞数为(173±23)个和(38±6)个分别较miR-NC组(647±31)个和(131±11)个减少(P<0.01)。4.转染miR-34a mimic的MDA-MB-231和MCF-7细胞凋亡率为(35.90±1.7740)%和(44.80±1.5400)%分别较miR-NC组(15.8±0.9103)%和(16.20±1.130)%增加(P<0.01);两株细胞均出现明显的Go/G1阻滞(68.56±2.2087)%vs(53.62±2.5875)%(P<0.01)和(69.2±1.5670)%vs(51.62±1.5750)%(P<0.01)。5.经TargetScan、PicTar、miRanda三个软件共同预测并结合文献查阅,筛选出miR-34a可能的靶基因有NOTCH1、MET、SIRT1、CDK6、E2F3、E2F5。结论:1.miR-34a在人乳腺癌组织和癌细胞中的表达都明显下调,其表达水平与乳腺癌的发生发展密切相关。2.miR-34a能够抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的增殖、迁移和侵袭能力,增加细胞凋亡率,使细胞周期阻滞在Go/G1。3.miR-34a可能是通过抑制NOTCH1、MET、SIRT1、CDK6、E2F3、E2F5的表达发挥抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭等作用。