目的:通过对脑立清系列制剂处方投料、生产工艺、质量标准、外源性残留等方面的深入研究,建立涵盖药材、饮片和成品的质量评价体系,评价不同剂型、不同来源、不同批次脑立清制剂的质量,为脑立清系列制剂的质量控制提供理论依据和科学参考,为科学监管提供技术支撑,保障人民用药安全。方法:1.以虎掌南星的成分水麦冬酸为指标成分,采用液相色谱-三重四级杆质谱联用技术建立脑立清系列制剂中掺伪虎掌南星的检查方法,对样品中清半夏的投料情况进行筛查。2.樟脑与冰片外观相似,气味相近,但樟脑内服会对人体产生一定的毒副作用,给制剂带来安全风险,采用气相色谱法建立脑立清系列制剂中樟脑残留量的测定方法,对冰片原料以及88批样品中的樟脑残留量进行测定。3.采用高效液相色谱法对猪胆汁、猪胆粉、猪胆汁膏的成分进行比较,发现了一种差异成分:甘氨-3β-羟基-6-氧代-胆烷酸,从猪胆粉中分离鉴定了该成分并报道其完整的核磁共振图谱数据。研究发现该成分是猪胆汁加工为猪胆粉或猪胆汁膏过程中以温度为主要驱动力通过构型转化生成的副产物,将甘氨-3β-羟基-6-氧代-胆烷酸的峰面积与两种构型胆烷酸的峰面积之和的比值作为转化率评判指标,考察该成分在样品中的存在情况。4.为更好地控制脑立清系列制剂的质量,建立了以下方法测定处方中部分药味的含量:采用LC-MS内标法建立脑立清系列制剂中β-蜕皮甾酮、25R-牛膝甾酮、25S-牛膝甾酮、牛磺猪去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、甘氨鹅去氧胆酸6种甾体类成分的定量分析方法;分别采用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）和原子吸收分光光度法测定脑立清系列制剂中的铁元素和钙元素的含量。对脑立清系列制剂中牛膝、猪胆汁（猪胆粉或猪胆汁膏）、磁石、赭石、珍珠母的投料情况进行评价。5.脑立清制剂处方跨度较大,涵盖植物药、矿物药、动物药,除冰片薄荷脑外均为原粉直接入药,原料药材中的有害污染物存在直接向制剂转移的可能,本实验采用ICP-MS法建立了脑立清系列制剂中重金属及有害元素的测定方法,采用HPLC-MS法建立了脑立清系列制剂中黄曲霉毒素残留的检测方法,对脑立清系列制剂中外源性有害残留物的风险进行评估。6.脑立清系列制剂现行标准不统一,本实验从显微鉴别、理化反应、薄层色谱、含量测定四个方面对脑立清系列制剂标准进行以下研究:增加了脑立清丸中牛膝、珍珠母、清半夏、酒曲的显微特征,脑立清胶囊中酒曲的显微特征、脑立清片中牛膝和酒曲的显微特征;修订了脑立清丸和脑立清胶囊的理化鉴别、薄层鉴别方法,增加了脑立清片的理化鉴别、牛膝和猪胆粉的薄层鉴别;统一了脑立清丸和脑立清胶囊的含量测定指标,增加了脑立清片中薄荷脑和冰片的含量测定。结果:1.通过对脑立清系列制剂中水麦冬酸成分的检查,发现5家企业生产的15批次样品检出水麦冬酸成分,占总批次的17.0%,结果表明脑立清制剂中清半夏以虎掌南星投料或掺伪掺伪虎掌南星投料的问题比较严重,相关生产企业对清半夏原料把关不严,相关部门应加大监管力度,督促企业严格按照处方的规定进行投料生产。2.通过GC法对脑立清系列制剂中樟脑残留量的测定,发现10家企业的72个批次樟脑超出限度,占总批次的81.8%,表明生产企业在冰片原料的质量控制方面可能存在疏漏,建议企业加强冰片原料的管控,保证广大人民群众用药安全。3.通过对脑立清系列制剂样品中甘氨-3β-羟基-6-氧代-胆烷酸的测定,发现转化率超出10%的样品占98.9%,结果表明以猪胆汁或猪胆粉（汁膏）作为不同原料生产的样品化学成分之间存在显著差异,提示企业在猪胆汁加工过程中应重视成分异构化带来的潜在风险。4.通过对脑立清系列制剂中6种甾体类成分、铁元素、钙元素以及薄荷脑和冰片的含量测定结果进行化学计量学分析发现,部分企业的产品质量与总体质量水平差异较大,企业E、企业N生产的内部样品之间相似度差异较大,可能与原料的质量控制和生产工艺的稳定性有关,从单向多元方差载荷图观察发现,不同企业间投料使用的牛膝和冰片药材存在较大差异。5.通过对脑立清系列制剂中重金属及有害元素、黄曲霉毒素残留检查发现,1批样品中铅元素超出安全限值,3批样品中检出玉米赤酶烯酮。表明制剂中存在外源性残留超标的风险,应加强对脑立清系列制剂中外源性残留的控制。6.通过对脑立清系列制剂质量标准的研究,统一并提高了三种剂型的质量标准,保证系列制剂不同剂型关键质控项目的一致性。结论:本课题建立了脑立清系列制剂中水麦冬酸的补充检验方法、樟脑残留量的测定方法,研究了猪胆汁与猪胆粉和猪胆汁膏之间的成分变化规律、建立了脑立清系列制剂中6种甾体类成分的含量测定方法,测定了脑立清系列制剂中的铁元素和钙元素的含量,对部分原料及制剂进行了重金属及有害元素和黄曲霉毒素检查,统一并提高了脑立清丸、脑立清胶囊、脑立清片的质量标准,更好地控制脑立清系列制剂的产品质量,保证产品质量的均一性、有效性和安全性。