黄海棠内生真菌Talaromyces sp.(XZ-77)次级代谢产物研究

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植物内生真菌是指在其生命周期的某一阶段或所有阶段与寄主植物和谐共存的真菌群,其以容易获取、种类繁多、繁殖迅速、代谢途径及代谢产物多样而倍受关注。近年来植物内生真菌逐渐成为活性先导化合物的重要来源,在农、医药领域发挥越来越重要作用。黄海棠(Hypericum ascyron L.)为藤黄科金丝桃属植物,来自神农架大九湖湿地。前期研究中发现,其中一株内生真菌次级代谢产物具有α-葡萄糖苷酶抑制活性,为进一步探究黄海棠内生真菌次级代谢产物结构和生物活性多样性,对黄海棠叶中分离到的另一株Talaromyces属内生真菌XZ-77的次级代谢产物研究,希望能够获得具有新的活性先导化合物。真菌XZ-77以分子生物学方法,鉴定为Talaromyces菌属。采用大米培养基对XZ-77进行大规模发酵培养(3L锥形瓶发酵,共100瓶),乙酸乙酯浸泡萃取,浓缩至浸膏并用甲醇溶解,正己烷萃取除去甲醇溶液低极性部分,共得粗提物浸膏10.5 g。采用正、反向硅胶柱色谱,凝胶柱色谱,半制备,制备高相液相色谱法等分离纯化次级代谢产物,得到15个单体化合物;运用NMR、MS、CD等多种现代波谱学方法鉴定15个单体化合物结构,分别为Talarinoribosin A-C(1-3)、Talarolactonin A(4)、Pinophilones A(5)、3-O-methylfunicone(6)、Deoxyfunicone(7)、Pinophilones B(8)、6-demethylvermistatin(9)、Deoxmethopinophilone(10)、Nodulisporipyrone D(11)、Kojic acid(12)、Monapinones A(13)、Ergosteroli(14)、Peroxy-ergosterol(15)。包括5个新化合物,Talarinoribosin A-C(1-3)、Talarolactonin A(4)、Deoxmethopinophilone(10)。新化合物1-3为核苷类衍生物,在核糖的上有不同取代基,由于核苷衍生物大多数具有抗病毒活性,我们采用计算机虚拟活性筛选化合物1-3与新冠病毒主蛋白3CL蛋白水解酶的分子对接,结果显示化合物1-3可能对COVID-19主蛋白3CL蛋白水解酶显示中等强度的活性,结合能分别为-6.56、-5.91、-6.96 kcal/mol。抗胃癌HGC-27细胞增殖影响实验表明,化合物5、6、8、9对胃癌HGC-27细胞增殖有中等的抑制活性,IC50分别为0.16、0.19、0.25、0.22μmol/m L。
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