【摘 要】
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百合是世界上著名的球根花卉,在园林中有着广泛的应用。我国是世界百合资源的分布中心之一,约有46%的百合种类分布在我国各地,其中以西南地区野生百合资源最为丰富。宝兴百合(Lilium duchartrei Franch.)是中国特有的野生种百合,具有较高的观赏价值和一定的育种潜力。但其分布范围狭窄,且面临着生境破坏严重,易受病毒、真菌感染而退化等问题。因此,开展宝兴百合的保护研究刻不容缓。借助组织离
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百合是世界上著名的球根花卉,在园林中有着广泛的应用。我国是世界百合资源的分布中心之一,约有46%的百合种类分布在我国各地,其中以西南地区野生百合资源最为丰富。宝兴百合(Lilium duchartrei Franch.)是中国特有的野生种百合,具有较高的观赏价值和一定的育种潜力。但其分布范围狭窄,且面临着生境破坏严重,易受病毒、真菌感染而退化等问题。因此,开展宝兴百合的保护研究刻不容缓。借助组织离体培养技术有望在短期内获得大量幼苗,提高该种群数量,使之免于进入濒危物种之列。然而目前在其培养过程中,鳞茎发育缓慢仍是扩繁的一大难点。据此,本文以宝兴百合作为研究对象,采用离体组织培养的方式,初步探讨了多效唑(PBZ)、氯吡苯脲(CPPU)和腐殖酸(HA)三种植物生长调节剂(PGRs)对其鳞茎膨大发育的影响规律,以期提高宝兴百合的鳞茎质量,加快其保护繁育的步伐。主要研究结果如下:(1)从幼苗综合指标评价结果及鳞茎碳水化合物总量两个维度来看,PBZ对宝兴百合幼苗生长发育的促进效果最佳,HA对其生长发育的促进效果较弱,CPPU未能促进宝兴百合的生长发育。PBZ浓度为0.4mg/L,HA浓度为0.6mg/L时对宝兴百合鳞茎发育的促进效果较好。(2)三种PGR处理引起了鳞茎中激素含量的变化。相关性分析结果表明,脱落酸(ABA)、生长素(IAA)和反式-玉米素核苷(TZR)对鳞茎的膨大发育具有促进作用,而水杨酸(SA)和异戊烯基腺嘌呤(i P)则有利于可溶性总糖和蔗糖的积累。PBZ在提高鳞茎中ABA、IAA含量的同时,降低了其SA的含量;CPPU导致了ABA含量下降,而鳞茎中IAA、SA和i P的含量更高;HA提高了鳞茎中IAA的含量,同时引起了ABA、TZR和SA含量的下降。(3)鳞茎的形态变化受ABA和IAA含量的影响。鳞茎的干重和直径与ABA含量呈极显著正相关,同时鳞茎直径与IAA含量也呈极显著正相关。PBZ显著提升了鳞茎中ABA和IAA的含量,从而促进了鳞茎的膨大发育。CPPU降低了鳞茎中的ABA含量,导致鳞茎增重缓慢。HA提高了鳞茎中的IAA含量,进而促进了鳞茎的膨大。(4)鳞茎中的碳水化合物含量变化受到SA和i P含量的影响,SA和i P有利于可溶性糖和蔗糖的积累。PBZ和HA通过降低鳞茎中的SA水平降低了鳞茎中的可溶性糖和蔗糖含量,促进了淀粉的积累。CPPU提高了鳞茎中SA和i P的含量,引起鳞茎中可溶性总糖含量的上升和淀粉含量的下降。(5)腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGP)、颗粒结合淀粉合成酶(GBSS)和可溶性淀粉合成酶(SSS)是淀粉合成过程中的三种关键酶,其中AGP酶是淀粉合成过程的限速酶,而GBSS酶关系到鳞茎的形态建成,在鳞茎发育早期,其活性高于SSS酶,随着鳞茎不断发育完善,GBSS酶活性将逐渐下降。PBZ处理显著提高了鳞茎中三种淀粉合成关键酶的活性,随着培养时间的延长,鳞茎中GBSS酶活性与SSS酶活性的相对高低发生逆转,表明PBZ处理加快了鳞茎的发育进程。CPPU处理下鳞茎中AGP酶活性总体上与对照无显著差异,但鳞茎中GBSS酶活性相对SSS酶活性更高,表明鳞茎发育受到抑制。HA处理下鳞茎的淀粉合成关键酶活性整体上与对照无显著性差异,这可能是由于培养前期鳞茎淀粉积累过快引起了负反馈调节。
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