论文部分内容阅读
目的:子宫颈癌位居女性恶性肿瘤的第二位,对女性健康构成了严重威胁。高危型HPV(HR-HPV)的持续感染是引发子宫颈癌的主要而非唯一病因,还可能有其他HPV协同因素存在。ERK信号通路是MAPKs系统中最经典的通路,能够通过一系列级联反应将细胞外信号传导进入细胞核,激活核内的效应分子,进而对细胞的增殖与凋亡等生物功能进行调控。Src是第一个被鉴别出可诱导细胞转化的原癌基因,可激活体内多条信号通路,引起细胞的生理效应,在信号转导中起到重要作用。c-Fos与c-Jun是核内重要的转录因子,能调控许多基因的表达,对细胞生长和分化具有关键性的调节作用,其异常表达可促进肿瘤的发生和恶性演进。hn RNP E1作为一种RNA结合蛋白,参与调节m RNA的转运、代谢、剪切及表达等过程,与肿瘤的发生、发展关系密切。然而ERK与ERK信号通路上游蛋白Src和下游蛋白c-Fos、c-Jun、hn RNP E1在子宫颈癌变过程中的作用以及相互关系目前尚不清楚。本研究选取ERK信号通路关键因子Src、ERK1/2、c-Fos、c-Jun和hn RNP E1为观测指标,检测其在不同子宫颈病变阶段蛋白的表达,结合HPV 16感染情况,探讨HPV 16以及ERK信号通路中各关键因子在子宫颈癌发生发展过程中的作用,以期为子宫颈癌的病因和发病机制研究提供科学依据,为子宫颈癌的诊断和防治提供新思路。方法:选取2012年至2014年在山西省肿瘤医院、山西省妇幼保健院、山西省晋煤集团总医院确诊的正常子宫颈(NC)妇女34例,低度子宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)患者26例,高度子宫颈上皮内瘤变(CINⅡ/Ⅲ)患者57例,子宫颈鳞状细胞癌(SCC)患者59例为研究对象。采用结构式调查问卷,调查研究对象的人口学特征和子宫颈癌相关因素等资料,同时采集子宫颈组织标本。采用PCR法检测HPV 16感染状况,采用免疫组化法检测子宫颈组织中p-Src、p-ERK1/2、p-c-Fos、p-c-Jun和hn RNPE1蛋白的表达情况。应用SPSS17.0软件进行数据分析,用χ2检验、趋势χ2检验比较组间率的差异及变化趋势;用OR值及其95%CI评价疾病与因素间的关联强度;用spearman秩相关分析变量间的相关关系;采用多元logistic回归模型进行多因素分析;应用相加模型及交互作用指标RERI、API、S进行交互作用的定性和定量评估。结果:(1)NC组、CINⅠ组、CINⅡ/Ⅲ组和SCC组中,HPV 16的感染率分别为17.6%,42.3%,56.1%,62.7%,随着子宫颈病变的加重,HPV 16的感染率逐渐升高(?2趋势=17.99,P<0.001)。(2)NC组、CINⅠ组、CINⅡ/Ⅲ组和SCC组中,p-Src的表达率分别为23.5%、26.9%、29.6%、54.2%,且逐渐升高(χ2趋势=9.49,P=0.002);p-ERK1/2的表达率分别为39.4%、54.2%、58.9%、74.1%,且逐渐升高(χ2趋势=10.58,P=0.001);p-c-Fos的表达率分别为25.8%、33.3%、33.9%、60.3%,且逐渐升高(χ2趋势=10.39,P=0.001);p-c-Jun的表达率分别为51.5%、76.0%、67.3%、74.6%,差异无统计学意义(χ2=6.05,P=0.109);hn RNP E1的表达率分别为27.3%、54.2%、66.1%、81.4%,且逐渐升高(χ2趋势=26.59,P<0.001)。p-ERK1/2、p-c-Fos、hn RNP E1蛋白在子宫颈癌Ⅱ/Ⅲ期者的阳性率均高于Ⅰ期者,p-Src、p-ERK1/2、p-c-Fos、hn RNP E1蛋白在子宫颈癌淋巴转移者的阳性率高于未转移者(P<0.05)。(3)p-ERK1/2与p-Src、p-c-Fos、hn RNP E1,p-c-Jun与hn RNP E1蛋白表达之间均存在正相关关系(P<0.05),其他因子表达之间的相关性未见有统计学意义(P>0.05)。(4)HPV 16感染与p-ERK1/2蛋白表达在CINⅠ组、CINⅡ/Ⅲ组和SCC组均存在正相加交互作用。(5)采用多因素Logistic回归对不同级别子宫颈病变相关因素进行分析,最终进入模型的因素有:CINⅠ组为洗澡频率、首次性交年龄、妇科病史;CINⅡ/Ⅲ组为洗澡频率、首次性交年龄、妇科病史;SCC组为职业、首次性交年龄、妇科病史、产次。其中洗澡频率高为保护因素,职业为农民、首次性交年龄小、有妇科病史、产次多为危险因素。结论:(1)HPV 16感染者患CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、子宫颈癌的风险均增加。(2)p-Src、p-ERK1/2、p-c-Fos、p-c-Jun、hn RNP E1蛋白高表达可能导致患子宫颈癌的风险增加,ERK信号通路关键因子的活化与子宫颈癌的临床分期和转移密切相关。(3)p-ERK1/2蛋白与p-Src、p-c-Fos和hn RNP E1蛋白的表达均存在正相关关系,推测ERK信号通路可被其上游因子Src激活,活化后的ERK可能对下游的核转录因子c-Fos、c-Jun及转录相关核蛋白hn RNP E1存在调节作用,引起p-c-Fos、p-c-Jun、hn RNP E1蛋白的高表达,进而促进子宫颈癌癌变的进展和恶化,这可能是子宫颈癌发生的分子学机制之一。(4)HPV 16感染与p-ERK1/2蛋白高表达在子宫颈癌变中存在正相加交互作用,提示两者同时存在时可能增加子宫颈癌和癌前病变的发生风险。(5)洗澡频率高为子宫颈癌发生的保护因素,而职业为农民、首次性交年龄小、有妇科病史、产次多为子宫颈癌发生的危险因素。