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目的:胰腺癌是一种起病隐匿、发展迅速的消化道恶性肿瘤。目前,除根治性切除外,胰腺癌尚无有效的治疗方法。胰腺癌的遗传异质性与其高度恶性的生物学行为密切相关。MIB1（E3 ubiquitin ligase mind bomb 1）是一种E3泛素连接酶,参与各种细胞生物活动过程。我们前期试验证实MIB1在胰腺癌中表现为高表达,但MIB1在胰腺癌进展中的作用仍不清楚。本研究旨在探讨MIB1调控胰腺癌发生发展中的作用,并阐明其作用机制。方法:（1）使用TCGA数据库评估胰腺癌组织和胰腺正常组织中MIB1的m RNA水平。（2）用组织芯片和IHC检测胰腺癌标本中MIB1的蛋白水平。（3）收集我院胰腺癌组织标本并进行Western blot分析胰腺癌组织中MIB1蛋白水平。（4）在Bx PC-3和SW1990细胞中用两个不同的sh RNA沉默MIB1的表达。并通过MTS实验和克隆形成实验以及裸鼠成瘤实验探究敲低MIB1基因后对胰腺癌细胞的增殖和侵袭的影响。（5）通过过表达MIB1探究其对Bx PC-3和SW1990胰腺癌细胞增殖和侵袭的影响。（6）采用免疫共沉淀（co-IP）技术和蛋白质谱分析技术寻找并验证与MIB1相互作用的蛋白ST7。（7）运用邻近连接试验（Proximity Ligation Assay,PLA）以证实MIB1和ST7在Bx PC-3细胞中的相互作用。（8）利用si RNA/sh RNA沉默或质粒过表达MIB1及ST7后,用Western Blot、RT-PCR实验分别检测MIB1和ST7的蛋白和转录水平的变化。（9）用蛋白泛素化免疫共沉淀技术验证MIB1能否直接参与ST7的泛素化,并检测调控后的ST7蛋白半衰期变化。（10）构建MIB1的RING结构突变体,验证RING结构的E3连接酶活性。（11）运用胰腺癌组织芯片明确MIB1及ST7的相关关系。（12）沉默或不沉默以及过表达ST7探究其对胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力的影响。（13）单独或联合沉默MIB1和ST7后,在体内和体外实验探究其对胰腺癌细胞的增殖作用影响。（14）用沉默或不沉默ST7的Bx PC-3进行RNA-seq分析,对差异表达的基因进行KEGG通路富集分析,寻找显著调控的通路及基因。（15）单独或联合沉默IQGAP1和ST7后,利用Western Blot、RT-PCR实验检测两者蛋白及m RAN水平的变化;利用MTS实验探究其对胰腺癌细胞的生长增值能力。结果:（1）TCGA数据库评估胰腺癌组织和胰腺正常组织中MIB1的m RNA水平,发现MIB1在16%的胰腺癌中表达上调。（2）用组织芯片（n=25例正常胰腺组织,n=35例胰腺导管腺癌）和IHC检测胰腺癌标本中MIB1的蛋白水平,发现胰腺癌组织中MIB1蛋白水平明显高于正常胰腺组织（P＜0.001）。（3）对我院标本的Western blot分析证实,胰腺癌组织（n=12）的MIB1蛋白水平高于癌旁组织（n=12）。（4）体内体外实验证实沉默MIB1后抑制胰腺癌细胞（PANC-1和Bx PC-3）的增殖和侵袭。（5）体内体外实验证实过表达MIB1基因后促进了胰腺癌细胞（PANC-1和Bx PC-3）的增殖和侵袭。（6）蛋白质谱分析寻找到感兴趣的互作蛋白ST7,并进一步用co-IP证实MIB1与ST7的相互作用。（7）PLA证实了MIB1和ST7在Bx PC-3细胞中的直接相互作用。（8）发现MIB1基因敲除增加了胰腺癌细胞Bx PC-3、SW1990和ASPC-1细胞中ST7的蛋白水平,但不增加ST7的m RNA水平。相反,MIB1的过度表达降低了胰腺癌细胞中ST7蛋白的水平,且ST7的m RNA水平保持不变。（9）运用蛋白半衰期实验检测发现,MIB1的抑制延长了Bx PC-3细胞中ST7蛋白的半衰期。（10）MIB1-ΔRING突变体的表达不改变Bx PC-3细胞中ST7的泛素化水平,但过表达野生型MIB1则增加了ST7的泛素化水平。（11）评估发现胰腺癌组织芯片（n=35个样本）中ST7和MIB1的蛋白水平呈负相关（r=-0.3535,P=0.0372）。（12）MTS和克隆形成实验表明,两种不同的sh RNA沉默ST7,显著促进了Bx PC-3和SW1990细胞的生长及体外侵袭能力。（13）ST7沉默促进肿瘤生长,MIB1沉默抑制Bx PC-3细胞的增殖。ST7和MIB1的联合沉默在体外和体内都减弱了MIB1下调的抗增殖作用。（14）RNAseq分析及对差异表达基因的KEGG途径富集分析表明,ST7基因敲除上调了许多涉及肌动蛋白细胞骨架途径的基因。其中,ST7的沉默显著上调了IQGAP1的表达。（15）Western blotting和q RT-PCR分析证实ST7基因敲除增加了IQGAP1的m RNA和蛋白的水平;此外,单独的IQGAP1沉默抑制了Bx PC-3和SW1990细胞中的细胞生长;IQGAP1和ST7的联合沉默减弱了ST7沉默促进胰腺癌细胞生长的能力。结论:MIB1在胰腺癌组织和细胞中表现为高表达,并且MIB1高表达提示胰腺癌患者预后不良。MIB1在体内、体外都可促进胰腺癌细胞生长和侵袭。MIB1的N末端相关结构域负责MIB1-ST7的相互作用,其RING结构具有E3连接酶活性,降解ST7蛋白。MIB1通过靶向ST7降解而促进胰腺癌的进展。IQGAP1在ST7的抗肿瘤作用中发挥重要作用。因此,本研究提示MIB1靶向ST7进行降解,从而上调IQGAP1的表达水平并促进胰腺癌的进展。