【摘 要】
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近年来,在我国许多养鸭地区,针对Ⅰ型DHV进行主动免疫或被动免疫后,不能有效控制鸭病毒性肝炎,为揭示其原因所在,并为制定有效的防制措施提供科学依据,本试验对我国一些地区的DHV流
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近年来,在我国许多养鸭地区,针对Ⅰ型DHV进行主动免疫或被动免疫后,不能有效控制鸭病毒性肝炎,为揭示其原因所在,并为制定有效的防制措施提供科学依据,本试验对我国一些地区的DHV流行毒株进行了研究,并从中选择一株与Ⅰ型DHV有明显抗原差异的毒株研制了鸡胚化弱毒疫苗。
将河北样品HB1经鸡胚连续传代至63代,取其中几个代次的病毒进行检测。结果表明,待检毒株接种雏鸭可复制出Ⅰ型鸭肝炎的典型症状和病变;经PCR和RT-PCR,排除了样品中存在鸭瘟病毒和禽流感病毒的可能性;电镜下观察,待检毒株的颗粒直径约为20~30nm。在此基础上,进行了交叉中和试验,并用抗血清进行了交叉保护试验,结果显示,待检DHV与Ⅰ型DHV仅存在部分血清学相关性,明显属于Ⅰ型DHV的抗原变异株,命名为Ⅰv型。
从来自我国6个地区的9份样品中分离到9株病毒并鉴定为DHV。用Ⅰ型和Ⅰv型抗血清分别与9个分离株的第3~10代鸡胚毒进行了中和试验,结果显示,来自北京、山东、内蒙古的4个毒株属于Ⅰ型,而来自北京、河北、江苏、重庆的另外5个毒株属于Ⅰv型,说明近年来我国一些地区鸭病毒性肝炎的流行是由Ⅰ型DHV及其变异株所致。
经过鸡胚连续传代63次所培育的Ⅰv型毒株E63是一株适应于鸡胚且对雏鸭无致病性的鸡胚化弱毒疫苗株,其ELD50为10-6.12/0.1ml,免疫剂量为2.5×105.12ELD50,保存期为-20℃3~6个月。用E63经颈部皮下免疫1日龄雏鸭,7日龄时即可产生高峰期中和抗体,并可完全保护雏鸭抵抗同型强毒的攻击,此后中和抗体效价有所下降,但可持续至4周龄,说明该苗具有良好的免疫原性。
Ⅰ型和Ⅰv型弱毒疫苗或抗血清可有效保护雏鸭抵抗同型强毒的攻击,但Ⅰ型和Ⅰv型之间仅存在单向部分交叉保护,这是近年来我国养鸭业针对Ⅰ型DHV进行主动免疫或被动免疫后防制效果仍不确实的原因所在,因此,为有效控制我国DVH疫情,进一步研制二价抗体或二价疫苗是十分必要的。
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