红花黄酮醇合酶基因的分离与表达分析

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:jinnengm9min
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黄酮醇合成酶(flavonol synthase, FLS)基因是黄酮类化合物代谢途径过程的关键酶之一,本研究以红花不同开花时期的花瓣为材料,。利用RT-PCR和RACE分子生物学技术,成功克隆出黄酮醇合成酶FLS基因,并应用生物信息技术对其功能进行了预测。从红花花瓣中应用RT_PCR和RACE技术获得全长黄酮醇合成酶FLS基因,利用RT-PCR和RACE技术克隆红花花瓣中黄酮醇合酶基因全长红花花瓣中FLS基因cDNA全长为1201bp,开放阅读框为1011bp,编码个337氨基酸,分子量97743.8kD,等电点为5.06,分子式为C3630H6061N120101494S228。编码区为1011bp,非编码区为190bp。将红花FLS全长经过BLAST软件比对,该序列与黑心菊黄酮醇合成酶FLS,皱叶莴苣的变种,金花茶黄酮醇合成酶FLS,茶树黄酮醇合成酶FLS,洋桔梗黄酮醇合成酶FLS,洋桔梗金银花黄酮醇合成酶FLS,烟草黄酮醇合成酶FLS,矮牵牛黄酮醇合成酶FLS等物种的同源性较高。分别为82%,83%,74%,74%,73%,73%,73%,72%,运用生物信息学技术对全基因序列进行功能预测,对其保守区功能区的分析,推导出FLS蛋白拥有两个保守区域,FLS蛋白序列经跨膜和二级结构的预测,发现有两个跨膜区域,蛋白结构主要以螺旋和线状结构为主。运用实时荧光定量PCR进行了定量表达分析。
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