论文部分内容阅读
目的探讨温阳散寒除湿法(蠲痹颗粒)治疗类风湿关节炎(RA)的临床疗效、作用机制及其安全性,为温阳散寒除湿法治疗RA提供依据,丰富中医药防治RA理论。方法①引用国际公认的DAS28. CDAI、SDAI疾病活动指数疗效评价方法,将102例寒湿痹阻型RA患者,随机分为治疗组68例和对照组34例,分别采用蠲痹颗粒(45g/d)、正清风痛宁缓释片(120mg/d)治疗8周后,考察其临床疗效和安全性。②建立角叉菜胶致大鼠急性足跖肿胀炎症模型和棉球异物植入诱导大鼠肉芽组织增生慢性炎症模型,随机分为模型组、阳性药组(DEX)、蠲痹颗粒低中、高剂量组。药物干预后,检测蠲痹颗粒灌胃给药对急、慢性炎症反应的影响。③建立CIA大鼠模型,随机分为空白对照组、模型组、阳性药组(MTX)及蠲痹颗粒低、中、高剂量组。药物干预后,关节炎指数(AI)评分法评价关节炎发病程度,石蜡切片HE染色观测踝关节滑膜组织炎症,ELISA法检测血清IL-1p水平。④建立CIA小鼠模型,按临床评分平均分为模型组,阳性药组(MTX),蠲痹颗粒组。药物干预后,关节炎临床评分法评价关节炎发病严重程度,X线钼靶摄片、石蜡切片HE染色分别观测小鼠足爪关节和关节炎病理损伤程度,3H-thymidine掺入法检测CIA小鼠胶原特异性免疫应答水平,流式微珠阵列法(CBA)、ELISA法分别检测胶原诱导的脾淋巴细胞IL-6、TNF-α、IL-17A及IFN-γ,IL-10产生水平,流式细胞术(FACs)检测脾淋巴细胞表面(CD4、CD8、B220比例)及胞内细胞因子(IFN-γ、IL-17A)的表达。结果①临床观察结果显示,治疗组在总体疗效,证候积分、CRP、ESR及DAS28、 CDAI、SDAI评分等改善方面优于对照组(P<0.01,P<0.05),且安全性良好。②温阳散寒除湿法对大鼠角叉菜胶所致足跖肿胀和棉球异物植入引起的大鼠慢性炎症性肉芽组织增生均有显著抑制作用(P<0.05)。③能改善CIA大鼠关节炎AI评分(P<0.05)及关节滑膜炎症评分(P<0.01),抑制大鼠关节滑膜组织炎细胞浸润、组织细胞增生,降低大鼠血清IL-1p水平(P<0.01)。④能改善CIA小鼠关节炎临床评分(P<0.01),减轻关节炎细胞浸润及骨质损伤,抑制小鼠胶原特异性免疫反应(P<0.01),下调胶原诱导的脾淋巴细胞胞内、胞外IL-17A水平,上调脾淋巴细胞IL-10产生水平(P<0.01),一定程度促进Treg细胞的表达,而对IFN-γ、TNF-α、IL-6及淋巴细胞亚群(CD4、CD8、B220比例)无明显影响。结论①温阳散寒除湿法是临床治疗RA安全有效的方法。②温阳散寒除湿法具有显著的抗炎作用。③对CIA大鼠、CIA小鼠关节炎具有防治作用。④调控Th17细胞/Treg平衡,下调IL-17A表达,诱导IL-10释放,可能是温阳散寒除湿法治疗RA的作用机制之一。