【摘 要】
：
本文研究的核心内容是围绕大规模制备药用质粒DNA这一主题展开的.它主要是以含有pcDNA3的E.coli DH5 α菌株为对象,系统的对发酵,常规的细胞裂解方法以及大规模制备质粒DNA的
论文部分内容阅读
本文研究的核心内容是围绕大规模制备药用质粒DNA这一主题展开的.它主要是以含有pcDNA3的E.coli DH5 α菌株为对象,系统的对发酵,常规的细胞裂解方法以及大规模制备质粒DNA的非色谱纯化的方法——CTAB法进行研究.从摇瓶小试到10L发酵罐中试,研究了搅拌转速、接种量、培养时间等发酵参数及葡萄糖、抗生素、无机盐等成分对菌体浓度和质粒产量的影响,优选出最佳的培养基和培养条件.其次,针对含有pcDNA3的E.coli DH5 α菌株研究常规质粒DNA粗提方法,确定碱裂解方法为最适宜的方法.在大量制备质粒DNA(500mL)的过程中,质粒产量为2.18mg,收率为75.65%,稳定性与重复性均较好.最后研究了基因治疗用载体质粒DNA的一种非色谱的大规模纯化方法——CTAB沉淀法,并对这种方法进行了工艺优化.
其他文献
SAPO-34是最适合甲醇制烯烃(MTO)反应的分子筛,低硅SAPO-34分子筛具有酸性较弱的优势,在一定程度上抑制焦炭的生成,缓解孔口堵塞,延长分子筛的催化寿命。然而,目前低硅SAPO-34分子筛的合成,面临依赖昂贵模板剂、晶化时间长、易生成杂晶等问题。本论文以廉价三乙胺(TEA)为主模板剂,以吗啡啉(Mor)、二乙胺(DEA)、四乙基氢化铵(TEAOH)为辅模板剂,采用直接水热法、晶种法和晶种
培养学生良好的道德素质是学校教育的重要育人目标,育人要以育德为首.本文作者结合自身在学校工作中的德育经验,从三个方面展开详细的阐述,包括从学生终身发展出发确定德育目
Common wheat is one of the most important crops in China,which is the largest producer in the world.A set of 230 cultivars was used to identify yield-relate
Physiological disorder caused by gene mutations in plants could result in lesion mimics(LMs).Plants with LMs have a phenotype similar to those with programm
SQUAMOSA结合蛋白(SBP)是一类植物特有的转录因子,在植物花和果实发育过程中起着重要作用.本研究以大粒品种陕512幼穗为材料,提取RNA扩增得到小麦TaSPL17的3条不同的cDNA
茄子(Solanum melongena L.)作为大众餐桌上即为常见的菜,其富含大量花青素,具有很高的营养价值,其根、茎、叶和种子具有一定药用价值,其萼片也经常出现在餐桌上,具有很好的
普通高中教育是国民教育体系的重要组成部分,在整个教育体系中起着承上启下的作用.普通高中教育对于建设教育强国和人力资源强国意义重大,是建设创新型国家的重要支撑.在深化
受光合作用启发，人工模拟光合作用体系作为一个突破口，成为太阳能转换成燃料研究的重要课题。光合系统Ⅱ(PSⅡ)是光合作用中重要的过程，即吸收太阳光能，氧化水，电子分离和质子的转
[目的]中间偃麦草(hinopyrum intermedium,2n=6x=42,JJJSJSStSt 或EeEeEbEbStSt)是小麦遗传改良的重要野生亲本,高抗"三锈"、白粉病等小麦病害,耐逆性强.开发中间偃麦草