【摘 要】
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目的:通过测量肝肾亏虚型腰痛和非肝肾亏虚型腰痛患者黄韧带厚度与黄韧带中Collagen TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ的表达情况,探讨肝肾亏虚型腰痛和非肝肾亏虚型腰痛患者黄韧带中Collagen TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ的表达水平和黄韧带厚度的相关性。方法:收集2020年1月至2020年12月广西中医药大学附属瑞康医院脊柱外科住院期间行腰椎后路开放性手术的患者,记录其一般临床资料、体征、中医证型、受累节段、通过MR
【基金项目】
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2020年国家自然科学基金项目（项目批准号:81960879）；
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目的:通过测量肝肾亏虚型腰痛和非肝肾亏虚型腰痛患者黄韧带厚度与黄韧带中Collagen TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ的表达情况,探讨肝肾亏虚型腰痛和非肝肾亏虚型腰痛患者黄韧带中Collagen TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ的表达水平和黄韧带厚度的相关性。方法:收集2020年1月至2020年12月广西中医药大学附属瑞康医院脊柱外科住院期间行腰椎后路开放性手术的患者,记录其一般临床资料、体征、中医证型、受累节段、通过MRI测量黄韧带的厚度值。参考国家中医药管理局制定的《中医病证诊断疗效标准》,分别纳入肝肾亏虚型腰痛30例为实验组,非肝肾亏虚型腰痛30例为对照组。实验标本为术中取下的腰椎黄韧带组织,用生理盐水清洗杂质,放入无菌试管中,继而迅速放入液氮罐后转移至-80℃冰箱备用,分批取出解冻后,通过蛋白印迹法（Westernblot）对黄韧带中Collagen TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ三种胶原蛋白进行定量测定,对比在MRI上通过PACS影像软件测量该节段黄韧带的厚度值。以评估三种胶原蛋白和黄韧带厚度间的关系。所得试验数据使用采SPSS22.0进行统计学分析。结果:MRI测量黄韧带厚度的结果为:实验组L3/4（4.78±0.12）mm、L4/5（4.79±0.15）、L5/S1（4.79±0.18）;对照组L3/4（2.63±0.12）、L4/5（3.31±0.13）、L5/S1（2.36±0.15）。实验组和对照组均进行方差齐性检验,经方差分析,L3/4、L4/5、L5/S1行方差齐性两独立样本t检验。L3/4、L4/5、L5/S1实验组和对照组黄韧带厚度存在显著差异,差异有统计学意义（结果如下）。L3/4（t=20.454,P=0.000<0.001）;L4/5（t=25.510,P=0.000<0.001）;L5/S1（t=32.234,P=0.000<0.001）Western Blot蛋白印迹检验对肝肾亏虚组和非肝肾亏虚组Collagen TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ含量进行检测,实验组和对照组均经内参抗体校正,得到图片条带,使用image J软件对图片条带进行灰度值测量,结果为:实验组ColⅠ（0.80±0.02）、ColⅡ（0.87±0.04）、ColⅢ（0.57±0.07）;对照组ColⅠ（0.58±0.05）、ColⅡ（0.78±0.07）、ColⅢ（0.59±0.05）。实验组和对照组均进行方差齐性检验,经方差分析,ColⅠ、ColⅡ行方差不齐性两独立样本校正t检验（t’检验）;ColⅢ行方差齐两独立样本t检验。ColⅠ、ColⅡ实验组和对照组存在显著差异,差异有统计学意义,ColⅢ实验组和对照组无明显差异,无明显统计学意义。ColⅠ（t=20.788,P=0.00<0.001）;ColⅡ（t=6.830,P=0.000<0.001）;ColⅢ（t=-1.156,P=0.252>0.05）对比同一样本中黄韧带MRI测量厚度和Collagen TypeⅠ、Ⅱ、Ⅲ含量,采用Pearson相关性检验对二者进行相关性分析,结果为:ColⅠ和黄韧带厚度存在显著正相关（r=0.974,P=0.000<0.001）,ρ的可信区间为（0.943,0.989）;ColⅡ和黄韧带厚度存在显著正相关（r=0.873,P=0.000<0.001）,ρ的可信区间为（0.698,0.976）;ColⅢ和黄韧带厚度无明显相关（r=-0.264,P=0.159>0.05）,ρ的可信区间为（-0.535,0.031）。结论:1、肝肾亏虚型腰痛患者经MRI测量的黄韧带厚度明显增大,可能是导致相应临床症状的重要原因之一。2、肝肾亏虚型腰痛患者黄韧带中Collagen TypeⅠ、Ⅱ含量较高,可能由于肝主筋、肾主骨,肝肾亏虚导致筋骨失养,韧带退变,在相同应力情况下,为维持机体正常活动需要,机体代偿性增加胶原纤维含量,以增加其拉力和抗压应力。3、肝肾亏虚型腰痛患者黄韧带厚度和Collagen TypeⅠ、Ⅱ呈正相关,可能是由于黄韧带退变引起的胶原纤维化增生,进而导致黄韧带出现肥厚。
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