论文部分内容阅读
红曲霉发酵所产生的生理活性物质Monacolin K是近年研究的热点之一。目前,功能红曲的研究主要涉及以下三个方面:一是筛选高产Monacolin K的优良菌种;二是优化培养基,确立适当的培养条件;三是扩大生产规模。基于上述三个方面,本论文采用较有优势但现有研究还不够深入的固态发酵法,通过优化实验,力求克服传统固态发酵的不足,融入现代发酵技术,探索现代固态发酵生产Monacolin K的新工艺,提高红曲霉固态发酵产Monacolin K的产量,为进一步研究和工业化生产打下基础。
首先,对HPLC法检测Monacolin K的方法进行了研究,确立了最佳色谱条件。红曲霉发酵样品中Monacolin K的HPLC法的最佳色谱条件为:Kromasil C18(250x4.6×5μm);流动相:乙腈/0.01%磷酸溶液=55/45(v/v);流速:0.8 mL/min;进样体积:10μL;检测波长:237nm;柱温:25℃。在该条件下,20min内即可检测出样品中Monacolin K的含量。该法具有准确度好的特点。
其次,通过分离纯化及筛选,确定了红曲霉菌株GM011为典型的功能红曲霉菌株,并且根据李钟庆的分种检索表和红曲菌种的描述表,初步判定功能红曲霉菌株GM011为红色红曲霉Monascus ruber van Tieghem。
最后,通过实验确定了功能红曲霉菌株GM011固态发酵产Monacolin K的最佳培养条件:大米75 g、添加黄豆粉3%、蛋白胨1%、NaNO<,3>0.3%、甘油3%、葡萄糖1%、MgSO<,4>0.1%、KH2PO<,4>0.1%。pH6.0-6.5,接种量为6%,种龄72h,用500mL三角瓶培养,起始含水量为30%,培养时间为15天,开始5天控温在30℃,第6天降至28℃,第7天降至26℃培养9天。在此条件下培养效果最好,MonacolinK产量可达到4.57mg/g。另外,初步探讨了目前国内外文献中未能见到的中草药的添加对Monacolin K产量的影响。