乙型肝炎病毒前S2蛋白激活人酰基蛋白硫酯酶1启动子的研究

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目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S2蛋白(preS2)对人酰基蛋白硫酯酶1(APT1)启动子的作用。方法:应用生物信息学方法确定人APT1启动子序列。PCR扩增人APT1启动子和HBV preS2基因,分别插入pGL3和pcDNA3.1(-)质粒构建人APT1启动子荧光素酶报告基因质粒p GL3-APT1和HBV preS2真核表达质粒pcDNA3.1(-)-preS2。将p GL3-APT1和pcDNA3.1(-)-preS2共转染人肝癌细胞系Hep G2,接着检测细胞荧光素酶活性,进而评估preS2对人APT1基因启动子的作用。数据用独立样本t检验分析。结果:测序结果证实pcDNA3.1(-)-preS2与pGL3-APT1与实验设计相符。pGL3-APT1的荧光素酶活性是阳性对照质粒pGL3-Control的荧光素酶活性的1.2倍(P<0.01)。pcDNA3.1(-)-preS2与pGL3-APT1共转染Hep G2细胞的荧光素酶活性为无preS2基因质粒的pcDNA3.1(-)与pGL3-APT1共转染HepG2细胞荧光素酶活性的2.6倍(P<0.01)。结论:本研究克隆的人APT1启动子序列具有高启动子活性;HBV preS2可激活人APT1启动子。
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