【摘 要】
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植物源农药是新农药创制的主要方向之一。实验室前期通过对110种中草药提取物杀虫活性筛选,发现荸荠（Eleocharis dulcis（Burm.f.）Trin.）皮提取物具有较好的杀蚜活性,然而,其杀蚜成分尚未见系统报道。因此,本研究采用活性追踪分离法对荸荠皮提取物进行分离鉴定,以期明确其杀蚜活性物质,为新型植物源杀蚜剂的创制提供先导化合物,并将提取物开发成制剂,为该新型植物源杀蚜剂的开发应用奠定
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植物源农药是新农药创制的主要方向之一。实验室前期通过对110种中草药提取物杀虫活性筛选,发现荸荠（Eleocharis dulcis（Burm.f.）Trin.）皮提取物具有较好的杀蚜活性,然而,其杀蚜成分尚未见系统报道。因此,本研究采用活性追踪分离法对荸荠皮提取物进行分离鉴定,以期明确其杀蚜活性物质,为新型植物源杀蚜剂的创制提供先导化合物,并将提取物开发成制剂,为该新型植物源杀蚜剂的开发应用奠定基础。主要研究结果如下:1.采用点滴法和浸叶法测定了荸荠皮乙醇提取物对豌豆修尾蚜、豌豆蚜、麦长管蚜和棉蚜的杀蚜活性,结果表明,荸荠皮乙醇提取物对4种蚜虫均有较好的活性,其中对麦长管蚜和棉蚜的活性较强,48 h的LC50值分别为95.92和81.04 mg/L。2.采用点滴法测定了荸荠皮不同萃取物对豌豆修尾蚜的杀蚜活性,结果显示,石油醚和乙酸乙酯萃取物对豌豆修尾蚜活性较强,48 h的LC50值分别为151.02和173.70 mg/L,其杀蚜活性均高于对照组苦参碱（LC50=656.06 mg/L）。可见,荸荠皮提取物的杀蚜活性成分集中在石油醚和乙酸乙酯萃取物中。3.采用活性追踪分离法分别对石油醚和乙酸乙酯萃取物进行柱层析分离,从石 油 醚 萃 取 物 中 分 离 鉴 定 出 4 个 化 合 物:4’,5’-Dimethoxy-6,6-dimethylpyranoisoflavon、3-methoxy-4-hydroxylonchocarpin、4-hydroxylonchocarpin 和 4-methoxylonchocarpin;从乙酸乙酯萃取物中分离鉴定出 5 个化合物:barbigerone、lonchocarpusone、6a,12a-dehydrodeguelin、13-homo-13-oxa-6a,12a-dehydrodeguelin 和 deguelin。生物活性测定显示,化合物4-hydroxylonchocarpin的杀蚜活性最高,对豌豆修尾蚜、麦长管蚜和豌豆蚜48 h的 LC50值分别为 97.24、140.63 和 112.31 mg/L。4.通过对溶剂、乳化剂等助剂的筛选,研制出10%的荸荠皮环保型乳油,配方为:10%荸荠皮提取物+3%农乳500#+1%tween-80+86%溶剂油150#,且质量检测符合国家质量标准;室内盆栽试验表明,10%的荸荠皮环保型乳油在稀释400、800和1600倍时,在药后7 d对豌豆修尾蚜的防效分别为90.32%、71.33%和62.40%,优于推荐剂量下0.5%苦参碱水剂;田间药效试验结果表明,10%的荸荠皮提取物乳油制剂对桃蚜、麦长管蚜和棉蚜均具有较好的防治效果,当其稀释200倍时,对棉蚜的防效为79.14%,与推荐剂量下70%吡虫啉水分散粒剂的防效（66.15%）相当,优于推荐剂量下0.5%苦参碱水剂（57.05%）。5.通过单因素考察以及Box-Behnken响应面优化确定了荸荠皮提取物纳米脂质体的最佳制备工艺为大豆卵磷脂:胆固醇:荸荠皮提取物质量比为5:4:1:1、介质PBS的pH值为7.3,水合温度为45℃,并选择氯仿作为有机溶剂。采用最优处方制备的荸荠皮纳米脂质体包封率为90.67%,粒径为222.55±2.59 nm;多分散指数（PDI）为0.11±0.03。透射电镜结果表明,脂质体呈圆形或椭圆形;体外释放试验表明,荸荠皮提物具有较好的缓释性;稳定性试验表明,荸荠皮提取物纳米脂质体在60 d内具有较好的稳定性,且在低温下保存稳定性更优。通过生物活性测定评价荸荠皮提取物纳米脂质体的杀蚜活性,结果表明荸荠皮纳米脂质体对豌豆修尾蚜的48和72 h的LC50分别为136.59和83.99 mg/L;对豌豆蚜的LC50 分别为 315.78 和 154.34 mg/L。以上结果表明,荸荠皮的主要杀蚜活性成分为4-hydroxylonchocarpin,荸荠皮乳油制剂和纳米制剂具有开发成植物源杀蚜剂的潜力。
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