兔骨折愈合的蛋白质谱分析

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目的:观察骨折愈合过程中骨痂蛋白质含量、种类与正常骨质的差别。寻找影响骨折愈合过程的差异蛋白质。并通过蛋白质质谱技术对其差异蛋白质分子进行质谱鉴定。为后续对其表达量及功能验证奠定基础。方法:建立兔上肢桡骨骨折模型,以对侧正常骨组织为对照组。随机将选取的家兔分为A B C3组(实验组),分别建立12周、8周、4周骨折模型以对侧正常骨组织为对照组,模拟骨折早、中、晚期。取出骨痂并提取骨组织蛋白,测定蛋白质浓度后,进行SDS-双向凝胶电泳、ImageMaster2DE软件分析,对差异蛋白质点采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱测定肽质指纹图谱并查询NCBInr数据库。结果:获得分辨率高具有可重复性的双向电泳银染图谱。图像分析检测骨痂组织平均蛋白点数为4周(732±21)8周(714±37)12周(754±45),正常组织平均蛋白点数为(698±31)。找出差异蛋白质点42个,并成功鉴定出9个差异蛋白点:巨噬细胞移动抑制因子、原肌球蛋白β-异构体2、磷脂结合蛋白1、醛-酮还原酶、谷胱甘肽S-转移酶、泛素/核糖体蛋白S27A融合蛋白、肽基脯氨酰顺反异构酶A、果糖二磷酸醛缩酶A、磷酸丙酮异构酶1。结论:利用SDS双向凝胶电泳技术能够分辨率高,且重复性好的蛋白质图谱。并发现骨痂组织与正常骨组织的蛋白质表达存在差异,上述这些差异蛋白质可能在骨折愈合过程中发挥作用。
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