第一部分络合铜纳米高分子复合材料的体外细胞毒性试验目的利用体外细胞培养技术,对络合铜纳米高分子复合材料(以下简称络合铜材料)的细胞毒性进行研究,为其临床应用提供实验依据。方法分别采用间接接触法(MTT法)和直接接触法评价络合铜材料的细胞毒性。MTT法:采用体外培养的小鼠成纤维细胞(L929),在培养液中分别添加不同浓度的络合铜材料浸提液(25%、50%和100%),于接种后第2、4、7 d通过MTT法显色,在酶标仪492 nm波长处测定吸光度值,计算细胞相对增殖率,对络合铜材料的细胞毒性进行评价;直接接触法:将L929细胞与络合铜材料直接接触培养,逐日用倒置显微镜观察细胞形态学发生的变化,评价络合铜材料的细胞毒性。结果在培养各时间点除阳性对照组毒性为4级(细胞增殖率为0～20%)外,其余均为0或1级(细胞相对增殖率>90%),除阳性对照组外,各实验组及阴性对照组OD值均随培养天数的增加而升高,培养2,4,7 d时阳性对照组的OD值明显低于其他组(P<0.01),阴性对照组与实验组间无显著差异(P>0.05)。L929细胞在络合铜材料表面粘附生长,随时间推移,粘附细胞数量增加,细胞数量及形态与阴性对照组比较无明显差异,评分络合铜材料的细胞毒性为0级。结论络合铜材料无明显细胞毒性,具有良好细胞相容性,是一种具有发展前景的输精管节育器材料。第二部分络合铜纳米高分子复合材料的急性全身毒性试验目的通过小鼠腹腔注射络合铜材料浸提液,以判断该材料的急性全身毒性作用。方法选20只20 g左右的健康小白鼠,雌雄各半,随机分2组,记录初始体重。实验组小鼠腹腔注射络合铜材料的生理盐水浸提液,剂量为50ml/kg,对照组注射生理盐水。注射后24、48及72 h观察小鼠一般状态及毒性表现和死亡数及体重变化。并于试验结束后抽取小鼠静脉血检测血液学指标。结果三天观察期内小鼠无死亡,各组动物未见中毒症状或不良反应,体重明显增加。实验组和对照组小鼠体重增长均无明显差异(P>0.05)。实验组与对照组血液学指标ALT、AST、TP、ALB、GLU、BUN和CRE,比较差异无显著性(P>0.05)。结论络合铜材料无急性全身毒性反应。第三部分络合铜纳米高分子复合材料的肌肉植入试验目的通过将络合铜材料植入新西兰白兔背部肌肉内,观察植入后不同时期该材料周围组织反应情况,以评价材料在肌肉组织中的组织反应程度。方法将络合铜材料植入新西兰大耳白兔(共15只)脊柱一侧肌肉,对侧假手术,每侧各选择4个植入点,每点间隔2 cm,将材料送入深度1～2 cm的肌肉内,缝合肌肉及皮肤,植入1、4、12 W分别处死各5只,取出脊柱两侧肌肉,肉眼观察植入部位有无皮下和肌肉组织异常病变。同时切取包裹材料样品周围0.5～1 cm的肌肉组织,伊红-苏木精染色,光学显微镜下观察,比较试验材料植入部位周围组织反应情况以及纤维囊腔厚度、炎症细胞和其他细胞存在情况、材料组织界面处的其他异常情况。结果植入1 W时,机体表现为急性炎症反应,络合铜材料局部组织的炎性细胞反应为Ⅳ级,未形成完整纤维包囊。4 W以后急性炎症反应逐渐消失,表现为中性粒细胞逐渐消失,代之以少量的淋巴细胞,组织-材料界面有致密的纤维囊腔形成,炎性细胞反应为Ⅱ级,囊腔反应为Ⅲ级。12 W后囊腔趋于稳定,炎性细胞及囊腔反应均为Ⅰ级。结论络合铜材料植入肌肉局部组织反应轻,组织相容性良好。