【摘 要】
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目的本研究的目的是探讨糖基化水平及B3GAT1表达在油酸（OA）引起的肝细胞脂肪变性中的变化,探索B3GAT1及糖基化在肝细胞脂肪过程中的作用,并验证B3GAT1是否可以通过调节糖基化介导的脂质代谢途径降低肝脏脂质沉积,为肝细胞脂肪变性的治疗提供新的理论依据。方法1.通过NCBI下载MAFLD的测序数据集GSE151158,GEO2R分析MAFLD活动评分（NAS）NAS≤3、NAS≥5)和健康对
【基金项目】
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湖南创新型省份建设专项:湖南省代谢相关脂肪性肝病临床医学研究中心（2021SK4031）； 湖南省自然科学基金面上项目（编号2021JJ30628）；
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目的本研究的目的是探讨糖基化水平及B3GAT1表达在油酸（OA）引起的肝细胞脂肪变性中的变化,探索B3GAT1及糖基化在肝细胞脂肪过程中的作用,并验证B3GAT1是否可以通过调节糖基化介导的脂质代谢途径降低肝脏脂质沉积,为肝细胞脂肪变性的治疗提供新的理论依据。方法1.通过NCBI下载MAFLD的测序数据集GSE151158,GEO2R分析MAFLD活动评分（NAS）NAS≤3、NAS≥5)和健康对照,将差异基因取交集,得到MAFLD进展相关基因,选取B3GAT1作为研究基因。2.实验细胞为LO2细胞,分为正常对照组及OA诱导组,诱导时间分别为3h、6h、12h、24h。OA组给与0.5m M OA诱导细胞脂变,使用TG检测试剂盒通过酶标仪检测TG含量,油红“O”染色试剂盒分析LO2细胞脂变后胞内脂质。并应用Western Blot检测各组B3GAT1表达情况;3.实验细胞为LO2细胞,根据实验设计分为control、OA、OA+Si RNA-B3GAT1、OA+p-EGFP-h-B3GAT1、NS-si RNA、PCDNA3.1。使用Western Blot分别检测不同处理组每组细胞B3GAT1的表达、LO2细胞脂变及脂代谢蛋白FASN、SREBP1c、ATGL含量。结果1.数据集GSE151158测序结果分析显示B3GAT1在MAFLD患者中表达下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）,并证明其对MAFLD具有诊断意义。2.0.5m M OA诱导LO2细胞脂变后,LO2细胞内TG及脂质均均随诱导时间增加而增多;OA诱导细胞脂变时间增加,B3GAT1表达下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。3.B3GAT1与LO2细胞脂变的关系:Si RNA-B3GAT1组细胞内TG及脂质含量对比其余组增高;p-EGFP-h-B3GAT1组细胞内TG及脂质均下降,对比OA组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;Si RNAB3GAT1组SERBP1c、FASN的表达增加;而p-EGFP-h-B3GAT1组SERBP1c、FASN的表达下降,ATGL表达无差异。结论1.OA诱导肝细胞脂变过程中,B3GAT1表达下降,肝细胞内脂质糖基化下降,肝细胞内脂质沉积。2.过表达B3GAT1可抑制脂质合成蛋白SERBP1、FASN的表达,从而减轻肝细胞脂变。
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