纳米靶向探针的构建及其调控肺癌细胞血管生成和上皮-间质转化

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目的:  构建基于Au DNEPs的CT/MR/光学三模分子影像探针并检测其成像效果,检测肺癌肿瘤细胞中BMX和SLUG相关基因的表达;SLUG基因的siRNA抑制肿瘤生长的效果,为探索携带相应siRNA的Gd-Au DENPs成为显像/治疗双功能探针做铺垫。  方法:  在已有的树状纳米金颗粒的靶向CT的探针的基础上,连结Gd和cy5.5,合成CT/MRI/光学多模态成像探针,用于非小细胞肺癌NCI-H460成像。用IHC和Western blotting方法检测非小细胞肺癌NCI-H460对BMX和SLUG基因的表达。采用RT-PCR和Western blotting检测设计的SLUG siRNA的干扰效果,对所选取的siRNA片段进行裸鼠动物活体干扰实验、成像研究来监测基因干扰效果。  结果:  BMX及SLUG基因在肺癌NCI-H460中均有表达。MRI不同时间点(分别注射前、2、4、12、24小时)的图像中显示肿瘤T1增强信号强度在4小时后到达高峰,之后逐渐降低。造影剂激发光量与浓度呈正比,而在裸鼠模型注入后达到峰值,后随着时间递减,6小时后基本廓清。收集转染后24小时、48小时的肺癌细胞进行SLUG基因表达的RNA和蛋白检测,结果显示片段1具有较显著的干扰效果。选择片段1作为siRNA试剂治疗肿瘤鼠,在肿瘤的增长速度、SLUG表达蛋白量上治疗组均值低于对照组。  结论:  成功构建并证实Gd-Au DENPs具有良好的显像性能;肺癌细胞及组织表达BMX及SLUG;Gd-Au DENPs-cy5.5具有较好的光学显像;成功合成SLUG的siRNA,并验证其在NCI-H460肺癌细胞及裸鼠活体中均具有良好的干扰作用。
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