沉默PLCε通过调控Notch通路及雄激素受体的核转位抑制前列腺癌增殖

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目的:研究磷脂酶Cε (PLCε)在前列腺癌组织中的表达并分析与临床病理参数的关系。探讨沉默PLCe对前列腺癌细胞增殖的影响及分子机制。方法:IHC法检测PLCε、Notch1及AR在57例前列腺组织(37例PCa、10例BPH及10例正常前列腺组织)中的表达并统计分析PLCε与临床病理参数之间的关系。PLCε干扰RNA腺病毒感染前列腺癌细胞PC-3(雄激素非依赖型)及LNCaP(雄激素依赖型)细胞株后,MTT法、克隆形成试验检测细胞增殖情况;实时荧光定量PCR检测PLCε、 cyclinD1、PCNA及c-fos等基因表达,western blotting检测PLCε、cyclinD1、 PCNA及c-fos等蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期;免疫荧光检测AR在细胞内的表达分布;分别运用Notch通路激活腺病毒和抑制腺病毒、AR通路激活剂和抑制剂处理细胞后,western blotting检测Notch1、Hes1、AR及PSA等蛋白表达。结果:PLCε、AR及Notch1在前列腺癌组织中表达明显高于在前列腺正常组织或BPH组织中的表达(P<0.001)。PLCe干扰RNA能明显抑制前列腺癌细胞增殖(P<0.05),阻滞细胞于S期(P<0.05),抑制Notch通路的激活和AR的核转位。结论:PLCε在前列腺癌中高表达。PLCsε干扰RNA对前列腺癌细胞增殖的抑制作用可能是通过抑制Notch通路激活和阻碍AR核转位来实现的。因此,PLCε可能作为一个潜在的分子靶点,为前列腺癌的早期诊断和治疗提供帮助。
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