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目的:本课题研究是以皖南医学院第一附属医院弋矶山医院神经外科和南京大学附属医院东部战区总医院神经外科收治的脑胶质瘤患者的手术标本为研究对象,旨在探讨转录因子人叉头框蛋白O4(FOXO4)和g0/g1转换调节蛋白3(FOSB)在胶质瘤中的表达,并进一步通过对体外胶质瘤细胞系(GBM)中FOXO4和FOSB的调控,观察两者对恶性细胞增殖和迁移表型的影响,寻找FOXO4和FOSB在胶质瘤中的作用,为临床上了解和治疗胶质瘤积累更多有价值的相关基础资料。方法:首先收集临床上确诊的脑胶质瘤病人在手术中切除的肿瘤组织标本,包括低级别胶质瘤标本(病理分级为WHOⅠ级和WHOⅡ级)和高级别胶质瘤标本(病理分级为WHOⅢ级和WHOⅣ级),再以正常脑组织标本作为实验对照组。采用Western Blot和免疫组化染色法检测FOXO4和FOSB在不同级别胶质瘤和正常脑组织中的表达,并统计分析是否有差异。然后,在体外细胞系的培养中进一步验证。运用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western Blot检测正常人星形胶质细胞系(HA)和五种胶质母细胞瘤(GBM)细胞系(U251、U118、U87、T98G、A172)中FOXO4和FOSB的表达差异。选出GBM细胞系中与HA细胞系差异较强的两个细胞株,针对FOXO4和FOSB的表达情况进行调控,转染过表达或敲减的慢病毒,建立稳转细胞株进而检测肿瘤表型。Western Blot法验证FOXO4和FOSB在转染后的胶质母细胞瘤细胞系中的表达差异。采用划痕实验、平板克隆法、细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法、Transwell法、裸鼠皮下种植等方法检测肿瘤表型,测定FOXO4或FOSB对胶质瘤细胞系肿瘤表型的影响。结果:免疫组化和Western Blot实验结果显示,FOXO4在胶质瘤组织中表达低于对照组的正常脑组织标本,其中高级别胶质瘤的FOXO4表达低于低级别胶质瘤(P<0.05)。进一步细胞系的实验中,FOXO4在GBM细胞系(U87和U251)中的表达低于FOXO4在HA细胞系中的表达(P<0.05)。FOXO4过表达稳转细胞株显著抑制了GBM细胞的增殖、迁移和侵袭,在CCK-8增殖实验中,发现FOXO4增加了肿瘤细胞的凋亡,FOXO4也降低了GBM细胞系的替莫唑胺(TMZ)抗性,同时抑制了裸鼠皮下移植的GBM细胞的生长(P<0.05)。同样运用免疫组化和Western Blot实验结果验证,FOSB在胶质瘤中的表达高于对照组的正常脑组织(P<0.05),尤其在高级别胶质瘤中更为明显。敲减FOSB基因后,FOSB下调,Caspase3的表达增加,即GBM细胞凋亡增加(P<0.05)。平板克隆和CCK-8实验表明,FOSB基因敲减后,U87和U251两种GBM细胞系的增殖能力下降,而Transwell实验表明FOSB基因敲减后,胶质母细胞瘤细胞株的迁移能力下降(P<0.05)。结论:FOXO4在胶质瘤中低表达,FOXO4具有抗胶质瘤的活性。而FOSB在胶质瘤组织中表现为高表达,下调FOSB后胶质瘤细胞增殖和迁移能力降低。提示FOSB可能对胶质瘤的发展和迁移具有促进作用。FOXO4和FOSB在胶质瘤中的表达可为今后了解和治疗胶质瘤提供实验基础资料,为靶向治疗胶质瘤奠定基础。