甜高梁(Sorghum bicolor)高频、高效离体培养再生体系的建立

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甜高粱[Sorghum bicolor(L.)Moench]为粒用高粱的一个变种,由于其生物学产量和茎秆含糖量较高,同时兼有耐旱、耐涝、耐贫瘠和耐盐碱等诸多优良特性,被认为是最具开发潜力的能源植物之一。利用基因工程技术对甜高粱进行遗传转化,对甜高粱品种改良及分子遗传学基础研究都具有重要意义;而建立高频、高效、具有稳定外植体来源、基因型依赖性弱、遗传稳定性好的离体培养再生体系是进行遗传转化研究的前提。因此,本研究主要以幼穗和芽顶端分生组织为外植体建立起两套甜高粱的离体培养再生体系。同时我们还探讨了在建立再生体系过程中的一系列问题。主要结果如下:   在幼穗愈伤组织诱导培养基中,除2,4-D外,添加2 mg/L ZT可以显著改善愈伤组织的诱导效果,增加每个外植体诱导出的可见愈伤组织块数目。幼穗愈伤组织再生分化的适宜激素组合为2 mg/L6-BA+0.5 mg/L KT+0.5 mg/L IAA。   在芽顶端分生组织膨大培养中,取来源于3天实生苗的外植体,最终可获得较高的分生组织膨大频率。在丛生芽诱导培养中,向培养基中添加适宜浓度的TDZ时,丛生芽的诱导频率明显提高;并得到适合甜高粱丛生芽诱导的最佳激素组合即4.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.5 mg/L TDZ。   在甜高粱再生芽的生根培养中,较低浓度的NAA(0.5 mg/L)能快速促进根的发生。   通过芽顶端分生组织直接诱导丛生芽的培养途径对基因型的依赖性弱,3种甜高粱品种的丛生芽诱导频率和诱导效率上也无明显差异。
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