【摘 要】
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目的:研究在肺动脉平滑肌细胞中,15-羟二十碳四烯酸(15-HETE)是否通过调节热休克蛋白90(HSP90)而发挥抗凋亡作用。
方法:通过wegtern blot实验探索15-HETE与热休克蛋白90
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目的:研究在肺动脉平滑肌细胞中,15-羟二十碳四烯酸(15-HETE)是否通过调节热休克蛋白90(HSP90)而发挥抗凋亡作用。
方法:通过wegtern blot实验探索15-HETE与热休克蛋白90的关系,应用MTT测定细胞活力、线粒体膜电势检测、TUNEL实验、以及通过western blot检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax等凋亡蛋白的表达和caspase-3活力的检测,探讨在15-HETE保护肺动脉平滑肌细胞凋亡过程中,热休克蛋白90的作用。
结果:外源性及内源性15-HETE均可以使热休克蛋白90的蛋白表达水平上调,并保护由血清饥饿引起的肺动脉平滑肌细胞的凋亡。热休克蛋白90参与15-HETE抑制肺动脉平滑肌细胞凋亡的过程,15-HETE可促进细胞生存、抑制caspase-3和caspase-9的断裂、下调Bax表达、上调Bcl-2蛋白的表达、抑制线粒体膜电势下降导致线粒体膜稳定性改变、抑制细胞核内染色体的浓缩和细胞核的破裂,而热休克蛋白90的抑制剂CCT018159可以逆转上述15-HETE的所有作用。
结论:本实验结果表明,15-HETE可以通过上调热休克蛋白90的蛋白表达而保护肺动脉平滑肌细胞凋亡。
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