戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是一种主要经粪-口途径传播的病毒性肝炎病原体,可以跨种间感染人和多种动物。戊型肝炎在亚洲和非洲国家不断暴发流行,已经成为严重的全球性负担,在一些发展中国家占到急性病毒性肝炎的50%。戊型肝炎早期一直被认为是一种急性自限性疾病,患者排毒3～4周后可自行康复。大量的临床研究表明:器官移植患者、HIV阳性患者、恶性肿瘤患者等免疫力低下人群和普通人感染HEV均能发展为慢性戊型肝炎感染,然而HEV感染导致慢性化的致病机制尚不清楚。因此,迫切需要了解HEV感染发展为慢性戊型肝炎的致病机理。本文旨在分子细胞水平和动物水平上探究HEV感染慢性化的致病机理并建立HEV感染慢性化的动物模型。本研究工作主要包括三个方面:(1)利用恒河猴慢性感染HEV模型探究HEV慢性化的机制(2)探究病毒基因组突变对HEV感染慢性化的影响(3)建立HEV感染慢性化模型。(1)利用恒河猴慢性感染HEV模型探究HEV慢性化的机制本文检测到健康恒河猴接种基因4型HEV(KU356187)毒株表现为急性感染,而另一组健康恒河猴接种基因4型HEV(KM01)毒株表现为HEV的持续性感染。对慢性化感染恒河猴中HEV全基因组测序并与原始毒株比对,发现HEV衣壳蛋白发生了连续的氨基酸突变。(2)病毒基因组突变对HEV感染慢性化的影响为进一步明确病毒的突变对HEV感染慢性化的影响,本文运用反向遗传学技术将突变区域敲除后构建恒河猴慢性化适应毒株的重组HEV病毒,转染A549验证重组病毒的感染性,可观察到重组病毒能够正常复制。(3)HEV感染慢性化模型的建立为验证重组病毒在活体上是否具有感染性,并且造成慢性化感染,本文建立了 HEV感染慢性化的小鼠动物模型,该模型成功模拟了 HEV感染慢性化的过程,揭示HEV衣壳蛋白的连续突变是造成HEV感染慢性化的主要原因之一。本文研究结果表明HEV衣壳蛋白连续的氨基酸突变会导致HEV感染的慢性化,这可能是普通人群感染HEV发展为慢性化的原因之一。本实验还建立了 HEV感染慢性化的动物模型,为进一步探究HEV慢性化的致病机理和抗HEV药物筛选奠定了基础。