为研究不同浓度硼对大鼠小肠上皮细胞增殖凋亡、屏障功能及组织结构的影响。本试验选用IEC-6细胞系为实验对象,采用CCK-8和流式细胞术等技术检测硼对IEC-6细胞的毒性作用及凋亡和周期的影响,筛选出0.8 mmol/L和40 mmol/L硼酸浓度为体外培养IEC-6细胞时的适宜添加量。然后加硼和特异性阻断剂阻断PI3K/AKT信号通路,检测PI3K和AKT分别单独阻断前后IEC-6细胞凋亡率、周期、增殖凋亡相关基因mRNA表达量及SIg A、Occludin和ZO-1蛋白表达水平。在前期研究的基础上,选用80只3月龄清洁级SD大鼠,随机分成8组（n=10）:空白对照组和试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组,对照组（硼浓度为0 mg/L）饮用蒸馏水,试验组分别饮用含10、20、40、80、160、320、640 mg/L硼的蒸馏水,试验期90天。试验结束后,采用HE染色、免疫组织化学、ELISA技术及RT-PCR等手段,显微观察拍照并测定相关指标。试验结果如下:1.硼对大鼠IEC-6细胞的毒性作用及增殖和凋亡的影响添加硼酸浓度为0.8 mmol/L时,IEC-6细胞的增殖率明显升高、凋亡率显著降低;当硼酸浓度为40mmol/L时,IEC-6细胞产生明显的毒害作用,凋亡率显著升高,增殖率下降。2.PI3K/AKT阻断前后硼对IEC-6细胞屏障功能及增殖和凋亡的影响体外培养细胞时,向细胞中添加不同浓度的硼,硼酸浓度为0.8 mmol/L可以促进IEC-6细胞的增殖,抑制细胞凋亡,提高IEC-6细胞免疫屏障功能;与之相反,添加40 mmol/L硼酸则抑制了 IEC-6细胞的增殖,促进其凋亡,屏障功能也随之降低,对细胞产生明显的损伤作用。而添加PI3K/AKT阻断剂后,在降低细胞活性和屏障功能的同时,也能改变硼对IEC-6细胞的作用,说明硼可以通过PI3K/AKT信号通路对IEC-6细胞的增殖、凋亡及屏障功能产生作用。3.饮水添加不同剂量硼对大鼠十二指肠形态结构及免疫功能的影响在40和80 mg/L组中大鼠十二指肠绒毛高度、隐窝深度及V/C比值分别升高,在320 mg/L组大鼠十二指肠绒毛高度、隐窝深度和V/C 比值分别降低。从组织学结构上,低剂量组中肠管的组织学结构完整,发育较好;而高剂量组（640 mg/L）中肠绒毛形态不规则,绒毛顶端的上皮细胞出现肿胀、破损和明显脱落。肠管中上皮内淋巴细胞、杯状细胞、SIg A、ZO-1及Occludin的含量在低剂量组中有增加的趋势,其中在40和80 mg/L组中上皮内淋巴细胞、杯状细胞、SIg A、ZO-1及Occludin显著性增加;而在高剂量组尤其是640 mg/L中肠道相关免疫细胞和肠道相关免疫球蛋白含量都显著降低。结果表明,适宜浓度的硼（40和80 mg/L）促进肠管的发育,加强肠管粘膜免疫功能,而高浓度的硼（640 mg/L）则会抑制肠管的发育甚至对肠管产生毒害作用。4.饮水添加不同剂量硼对大鼠十二指肠细胞增殖和凋亡的影响利用免疫组化技术观察硼对大鼠十二指肠细胞增殖和凋亡发现,PCNA 阳性细胞主要分布在肠隐窝,Caspase-3阳性细胞主要分布在肠绒毛。随硼添加量增加,PCNA 阳性细胞数呈现逐渐增长的变化趋势,而Caspase-3 阳性细胞数则呈现先降后增的变化趋势。由增殖基因PCNA和凋亡关键基因Caspase-3基因mRNA表达水平得出,20、40、80和160 mg/L组较对照组相比PCNA mRNA显著升高,而640 mg/L 组 PCNA mRNA 显著降低;20 和 40 mg/L 组中 Caspase-3 mRNA 显著降低,而320和640 aspase-3 mRNA显著升高。