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目的:在进一步研究石杉碱甲(Huperzine A,Hup A)对小鼠脑乙酰胆碱酯酶(ACHE)抑制作用的基础上,同时研究表没食子酸儿茶素没食子酸酯(EGCG)对AChE的抑制作用,以及二者的协同抑制作用,以探讨AlzheimerS disease(AD)等痴呆病症治疗的新途径。
方法:用改良Ellman法分光光度计比色检测不同Hup A浓度(5,10,20,40,80,120u g/kg)、EGCG(10,50,100,150,200,300mg/kg)和0.86%的生理盐水(即O浓度组)处理小鼠1h后小鼠脑AChE活性;另外,分别在0(即对照组),0.5,1,2,4,8,12,24h各时间点检测不同处理因素(Hup A80 u g/kg,Hup AIO ug/kg,Hup A5 ug/kg,Hup A10 ug/kg+EGCGlOOmg/kg,Hup A5 u g/kg+EGCGlOOmg/kg,EGCGl00mg/kg)处理小鼠后脑AChE活性,并计算AChE活性率和抑制率。
结果:①Hup A不同浓度对AChE的抑制在一定浓度范围内呈浓度依赖性,Hup A(5,10,20,40,80,120 u g/kg)与对照组(0浓度组)相比以及Hup A不同浓度组之间相比对AChE的抑制均具有显著性差异,P<0.01;②在lh,EGCG各浓度对AChE没有明显的抑制作用,P>0.05;EGCG(100mg/kg)浓度组在各时间点对AChE的抑制与对照组相比均无显著性差异,P>0.05;③Hup A(10 ug/kg)+EGCG(100mg/kg)组和Hup A(5 ug/kg)+EGCG(100mg/kg)组在每个时间点(0.5-12h)分别与Hup A(10 ug/kg)组和Hup A(5ug/kg)组相比,对AChE的抑制差异均具有统计学意义,P<0.01;④在lh,Hup A(10pg/kg)+EGCG(100mg/kg)和Hup A(5 u g/kg)+EGCG(100mg/kg)对AChE的抑制作用没有Hup A(80ug/kg)高,P<0.05;在2h,4h,8h,12h,Hup A(10g/kg)+EGCG(100mg/kg)和Hup A(5 u g/kg)+EGCG(100mg/kg)对AChE的抑制作用均比Hup A(80ug/kg)强,P<0.05。
结论:EGCG对乙酰胆碱酯酶没有明显的抑制作用,但是与石杉碱甲具有协同作用,可以增强石杉碱甲对乙酰胆碱酯酶的抑制能力和抑制时间,减少石杉碱甲的用量。