目的:通过体内及体外实验探讨注射型富血小板纤维蛋白(i-PRF)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)成神经细胞分化的能力及二者联合使用治疗坐骨神经损伤的疗效。方法:取10-15日龄SD乳鼠胫骨骨髓分离培养BMSCs至第4代后随机分为对照组(A组)及实验组(B、C组)。采用改良低速离心法备制i-PRF后分别取0、100、200ul加入各组12%FBS完全培养基中与BMSCs共培养,2周后i-PRF及血清浓度降低各50%。第7、14、21d观察各组细胞形态改变并以免疫组化法及Western blot检测其诱导结果。取成年SD大鼠24只采用钳夹法备制坐骨神经损伤模型后随机分为四组,A组鞘膜内注射BMSCs悬液+i-PRF;B组鞘膜内注射i-PRF;C组鞘膜内注射BMSCs悬液;D组鞘膜内注射生理盐水,每组6只。术后每周对各组大鼠进行BBB功能评分;术后2个月采用脱颈法处死大鼠取坐骨神经组织行透射电镜及HE染色观察神经修复情况;Western blot技术检测相关蛋白表达。结果:BMSCs经i-PRF诱导7天后细胞形态开始改变,21天后突触生长,出现类神经元细胞形态;细胞免疫组化显示:B、C组Nestin蛋白表达阳性;免疫荧光染色结果显示:B、C组S-100β蛋白表达阳性显著高于A组;Western blot检测结果显示:Nestin、N-cadherin蛋白相对表达量C组>B组>A组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。BBB功能评分曲线A组>B组>C组>D组,差异具有统计学意义(P<0.05)。HE染色可见A组神经纤维排列整齐,无缺损及脱髓鞘改变;B组神经纤维结构欠清晰,轻度肿胀;C组神经纤维部分结构紊乱,脱髓鞘改变;D组神经纤维连续性欠佳,明显脱髓鞘改变,神经外膜部分缺损。电镜观察显示:A组神经纤维结构清晰,髓鞘完整,胞核致密;B组稍次之;C组神经纤维结构模糊,有脱髓鞘变空;D组神经纤维结构紊乱,有脱髓鞘变空,神经外膜连续性中段。Western blot检测显示:各组均表达Nestind蛋白,且蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05);对于N-cadherin及GFAP蛋白,BMSCs+i-PRF组含量最高,i-PRF组含量次之,BMSCs组较PRF组降低,空白组含量最低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:i-PRF能有效诱导BMSc成类神经细胞分化,二者联合使用可提高治疗大鼠坐骨神经损伤疗效,为临床治疗周围神经损伤提供了新思路。