铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）是临床上常见的条件致病菌,其异质性耐药的发生常导致临床治疗失败。因此,本研究以广州地区临床分离的铜绿假单胞菌为研究对象,探究铜绿假单胞菌对青霉素类抗生素的异质性耐药机制,为相关临床感染治疗提供一定的依据。本研究收集中山大学第一附属医院临床分离的铜绿假单胞菌50株,并通过纸片扩散法（Kirby-Bauer disk diffusion test,K-B 法）、菌落谱型分析法（Population Analysis Profile,PAP）完成铜绿假单胞菌对青霉素类抗生素异质性耐药表型的初筛与确证;通过微量肉汤稀释法、生长曲线测定、传代稳定性实验检测异质性耐药特征;通过转录组测序、qRT-PCR验证实验对典型的异质性耐药菌株进行异质性耐药机制的分析。本论文主要研究结果如下:（1）铜绿假单胞菌对哌拉西林（piperacillin,PIP）、哌拉西林/他唑巴坦（piperacillin/tazobactam,TZP）和替卡西林/克拉维酸（ticarcillin/clavulanic acid,TIM）的异质性耐药率分别为52%（26/50）、52%（26/50）、54%（27/50）,耐药率分别为14%（7/50）、14%（7/50）、18%（9/50）。对初筛结果中的异质性耐药菌株进行菌落谱型分析确认,提示异质性耐药率为26%（13/50）。（2）本次随机挑选的这8株菌株的异质性耐药亚群的发生频率为7.3×10-7-1.2×10-5。耐药亚群少数能在大于异质性耐药菌株MIC值8倍的抗生素平板上生长,极少数甚至可以达到更高水平的耐药。耐药亚群传代稳定性大多良好,且其生长曲线未出现滞后现象,仅有一株耐药亚群PAS92（1）不稳定且恢复到原始菌株PAS92的敏感水平,但其生长实验表明并未发现生长滞后现象,即未产生适应性代价。（3）通过分析转录组测序结果和qRT-PCR验证结果,发现本次两个典型的异质性耐药菌株PAS57和PAS92对哌拉西林异质性耐药的机制均包括细胞壁生物合成基因上调、外排泵基因（mexA）上调以及生物被膜形成增加。不同点是PAS57鞭毛运动和黏附性相关的基因以及编码青霉素结合蛋白3（penicillin-binding protein 3,PBP3）的基因ftsI的表达也显著上调,而PAS92外排泵基因mexB的表达显著上调。本研究主要结论如下:异质性耐药的发生机制可能是复杂多样的,同一株菌的不同耐药亚群产生的异质性耐药机制可能也不尽相同,且其异质性耐药的产生也往往不是单一机制导致的。本次铜绿假单胞菌对青霉素类抗生素的异质性耐药机制可能与生物被膜的形成、细胞壁形成能力增强、外排泵的高表达以及药物主要作用靶蛋白PBP3的高表达有关。