【摘 要】
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抗生素为畜牧养殖业的发展做出了贡献,但随着行业和技术的发展问题也随之而来,抗生素的问题主要为增强病原菌的耐药性、造成抗生素残留、损害动物免疫功能、和微生物环境破坏。而中草药是最佳的抗生素替代品,天然无毒,甘草便是其中之一。甘草中的甘草黄酮具有抗菌、抗病毒、抗炎等作用,具有一定的促进动物生长功效,有着广阔的前景和巨大的应用潜力。甘草在工业生产中,经过提取后会剩余大量的甘草残渣,由于甘草酸、甘草次酸和
【基金项目】
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大连市重点研发计划项目（新型抗生素替代品产业化关键技术的研发,项目编号 2021YF16SN012）； 辽宁省科技厅科技援疆项目（新疆药食同源植物产品研究开发,项目编号 2019JH210200023）；
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抗生素为畜牧养殖业的发展做出了贡献,但随着行业和技术的发展问题也随之而来,抗生素的问题主要为增强病原菌的耐药性、造成抗生素残留、损害动物免疫功能、和微生物环境破坏。而中草药是最佳的抗生素替代品,天然无毒,甘草便是其中之一。甘草中的甘草黄酮具有抗菌、抗病毒、抗炎等作用,具有一定的促进动物生长功效,有着广阔的前景和巨大的应用潜力。甘草在工业生产中,经过提取后会剩余大量的甘草残渣,由于甘草酸、甘草次酸和甘草浸膏易溶于水,而甘草黄酮溶于有机溶剂,因此残渣中的甘草黄酮大多并未提取出来,从而造成巨大浪费。微切助互作技术（Press-shear Assisted Interaction,PAI）是ABTNL课题组自主拥有的知识产权,此技术可以打破植物细胞壁和部分细胞器,释放被细胞壁和细胞器封固的活性成分,因而能够大大提高活性物质的释放和溶解性且成本低廉。本论文旨在运用微切助互作技术,对甘草渣进行前处理,确定最佳提取方案;进行体外抑制大肠杆菌和沙门氏菌活性和二苯基苦基苯肼DPPH自由基清除实验,考察体外甘草渣总黄酮粗品抑菌和抗氧化活性;进行体内小鼠结肠组织增重率、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MAD）、过氧化氢酶（CAT）的测量,考察甘草渣总黄酮粗品对小鼠生长与免疫调节的影响。具体结果如下:（1）甘草渣采用2%二氧化硅助剂对甘草渣进行前处理后,总黄酮的提取率提高了56%,最佳提取工艺条件为:2%二氧化硅助剂,乙醇浓度65%,料液比1:15,提取时间75 min,提取温度为60℃。（2）甘草渣总黄酮粗品对大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度（MIC）分别为15.6μg/m L和500μg/m L,抑菌圈直径分别为11.3和9.1 mm;当甘草渣总黄酮浓度为200μg/m L时,对DPPH的抑制率最高,为83.80%。（3）实验进行6周,每隔一天灌胃一次200μg/g甘草渣总黄酮后,甘草渣总黄酮粗品对小鼠的体重并无显著差异影响,但降低了血清中的IL-6（雌鼠实验组比对照组降低了11.90 pg/m L,雄鼠实验组比对照组降低了15.18 pg/m L）、IL-1β（雌鼠实验组比对照组降低了4.70 pg/m L,雄鼠实验组比对照组降低了5.08 pg/m L）和TNF-α（雌鼠实验组比对照组降低了18.75 pg/m L,雄鼠实验组比对照组降低了24.05 pg/m L）,提高了IL-10（雌鼠对照组比实验组升高了15.11 pg/m L,雄鼠对照组比实验组升高了14.59 pg/m L）。降低了肠组织中的MDA（雌鼠实验组的MDA含量相比对照组降低了0.86 nmol/m L,雄鼠实验组的MDA含量相比对照组降低了1.06 nmol/m L）水平,提高了肠组织中SOD（雌鼠实验组的SOD含量比对照组高16.42 U/mgprot,雄鼠实验组的SOD含量比对照组高19.26 U/mgprot）和CAT（雌鼠实验组的CAT含量比对照组高1.47 U/mgprot,雄鼠实验组的CAT含量比对照组高1.49 U/mgprot）的水平。综上所述,微切助互作技术对甘草渣进行前处理后,可以有效提高甘草渣总黄酮的提取率,并且成本低廉,经济效益较高,有潜力适用于现实当中的生产当中。且甘草渣总黄酮具有一定的抗菌、抗氧化和免疫因子调节能力,有潜力适用于畜禽动物生产和防病、抗病当中,为后续应用提供一定的理论依据。
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