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轴周蛋白Periaxin是施旺氏细胞中特异性表达的支架蛋白之一,在髓鞘的形成与稳定中发挥重要作用。Periaxin基因的缺失或突变会引起脱髓鞘型腓骨肌萎缩症(CMT)4F亚型的发生。由于mRNA不同的剪切方式,periaxin基因编码了两种长短不同的含PDZ结构域的periaxin蛋白,即L-periaxin和S-periaxin。L-periaxin由N端到C端分别由PDZ结构域、核定位信号(Nuclear localization Signal,NLS)、重复序列结构域(Repeat domain)、酸性结构域(Acidic domain)四个结构域构成。而S-periaxin仅含有一个PDZ结构域。首先,我们对L-periaxin与S-periaxin之间的关系进行了探究。通过免疫荧光染色,我们发现L-periaxin与S-periaxin在RSC96细胞的细胞质中的共定位。之后通过GST pull-down,免疫共沉淀以及双分子荧光互补等实验证明了二者之间存在相互作用。进而构建各种截短型重组质粒,证实了二者之间的互作存在于二者N端的PDZ结构域之间,通过各自的PDZ结构域形成异源二聚体。我们进一步通过双分子荧光互补,结合流式细胞术实验发现,S-periaxin会抑制L-periaxin同源二聚体的形成。由此,我们推测,S-periaxin可能是L-periaxin发挥功能的一个调节因子。其次,我们还发现L-periaxin自身可以进行首尾互作,形成闭合环状结构。我们构建了L-periaxin的N端与C端各个结构域的重组质粒,通过GST pull-down,免疫共沉淀以及双分子荧光互补等实验,分别验证各个结构域之间的互作关系,最终发现L-periaxinN端的NLS结构域与其C端的酸性结构域之间存在明显的相互作用,并且可引起退行性疾病的点突变E1259K会影响该相互作用。之后通过免疫荧光定位发现该互作影响着L-periaxin在RSC96细胞中的定位,竞争性实验验证了该互作还受到DRP2蛋白的抑制。由此,我们推测出L-periaxin在RSC96细胞中的存在模式图:当L-periaxin转录翻译完成之后,被运输到细胞质中,以闭合环状的状态存在来激活或阻止某些功能的发挥;当其被输送到细胞膜时,由于DRP2与L-periaxin NLS结构域之间的强烈的相互作用,使其环状结构打开,从而结合DRP2等膜上配体,定位在细胞膜上并发挥维护和稳定髓鞘的功能。