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玫瑰(Rosa rugosa)是蔷薇科蔷薇属落叶灌木,品种繁多,花色丰富,香气浓郁,不仅是园林绿化和水土保持的优良植物材料,而且是香料工业、食品工业的重要原料。野生玫瑰原产我国,是国家二级濒危保护植物,主要分布在吉林图们江河口、辽宁南部海岸及山东东部沿海海岸,其特殊的生存环境造就其很强的耐盐性,是玫瑰及蔷薇属植物新品种培育的珍贵亲本材料。研究表明液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白和液泡膜H+-ATPase在植物抵御盐胁迫方面有着重要作用。本文以引自山东威海的野生玫瑰为试材,克隆了野生玫瑰液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因RrNHXl和液泡膜H+-ATPase c亚基基因RrVHA-c,并分析了盐处理下两个基因在野生玫瑰叶片中的时空表达规律。主要研究结果如下：1.以野生玫瑰幼嫩叶片为试材,利用CTAB法提取其总RNA,采用RACE法克隆得到了野生玫瑰耐盐相关基因RrNHXl和RrVHA-c的全长cDNA序列。RrNHXl基因全长2358bp,开放阅读框为1629bp,基因注册号为KC188664。该基因基因编码一个由543个氨基酸组成的多肽,推测分子量为60.10KD。RrNHXl蛋白有N端的12个疏水区域和一个较长的C-末端亲水性尾巴,其中10个疏水区域跨过液泡膜,第Ⅲ个跨膜螺旋含有氨氯吡嗪咪结合位点,属于NHX蛋白家族的第Ⅰ类蛋白,即液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白,与定位在内膜囊泡上的NHX蛋白家族Ⅱ类蛋白亲缘关系较远,与质膜Na+/H+逆向转运蛋白关系最远；RrVHA-c基因全长为781bp,开放阅读框为498bp,基因注册号为KF677023。该基因编码一个由166个氨基酸组成的多肽,推测分子量为16.7KD; RrVHA-c蛋白有5个较强的疏水区域,其中4个跨过膜结构。RrVHA-c属于V型ATP合成酶c亚基的家族成员,是在进化上非常保守的膜蛋白。2.利用荧光定量PCR技术研究了盐处理前后RrNHX1和RrVHA-c基因在野生玫瑰幼嫩叶片中的表达规律。结果显示：RrNHX1属于组成型表达的Na+/H+逆向转运蛋白,RrNHX1的表达量随着盐浓度的增加呈现先上升后下降的趋势,并且具有时间调控效应,说明RrNHX1与野生玫瑰耐盐性相关；RrVHA-c具有持家基因的表达特性,RrVHA-c与RrNHX1有相似的表达规律,在一定盐胁迫范围内协同增强,这与液泡膜Na+/H+逆转运蛋白和V-ATPase在植物抵御盐胁迫中的协同作用是一致的,进一步证明了它们与野生玫瑰耐盐性状有着密切的关系。